已酮可可堿對體外內(nèi)毒素誘導(dǎo)大鼠心肌細(xì)胞生成TNF-α的影響.pdf

1、目的：腫瘤壞死因子α(TNF-α)在心力衰竭發(fā)生發(fā)展中具有重要作用，已證實慢性心力衰竭患者血漿TNF-α水平明顯升高。已酮可可堿是一種黃嘌呤衍生物，臨床試驗證實它可以改善心力衰竭患者的臨床狀況；動物實驗亦報道已酮可可堿作為一種免疫調(diào)節(jié)劑可以抑制人類單核細(xì)胞生成腫瘤壞死因子-α。因此我們假設(shè)在心肌細(xì)胞中它有相似的作用機(jī)制。此實驗旨在通過觀察已酮可可堿對內(nèi)毒素誘導(dǎo)新生大鼠心肌細(xì)胞生成TNF-α的影響，探討已酮可可堿對大鼠心肌細(xì)胞可能的保護(hù)機(jī)

2、制。 材料與方法：取新生大鼠的心肌細(xì)胞加以培養(yǎng)，按不同的藥物處理分為四組：對照組(A組)、1μg/ml已酮可可堿組(B組)、10μg/ml已酮可可堿組(C組)、100μg/ml已酮可可堿組(D組)。加入生理鹽水(A組)和不同濃度的已酮可可堿(B、C、D組)作用一定時間后，再加入內(nèi)毒素刺激TNF-α生成。作用6小時后，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)法測定新生大鼠心肌細(xì)胞TNF-α的生成，用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法檢

3、測TNF-αmRNA的表達(dá)。 結(jié)果：已酮可可堿干預(yù)后，新生大鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)液中TNF-α的生成受到不同程度的抑制，且與預(yù)處理的已酮可可堿濃度呈正相關(guān)。其中1μg/ml已酮可可堿組、10μg/ml已酮可可堿組、100μg/ml已酮可可堿組的TNF-α的生成[(83.37±16.39)pg/ml，(35.43±2.60)pg/ml，(19.72±5.19)pg/ml]都顯著低于對照組[(98.50±7.99)pg/ml](P＜0.0

4、5)；已酮可可堿干預(yù)后，新生大鼠心肌細(xì)胞TNF-αmRNA的表達(dá)均受到不同程度的抑制，且與已酮可可堿濃度呈正相關(guān)。其中1μg/ml已酮可可堿組、10μg/ml已酮可可堿組、100μg/ml已酮可可堿組心肌細(xì)胞TNF-αmRNA表達(dá)(0.78±0.02，0.71±0.04,0.62±0.04)都顯著低于對照組(0.90±0.02)(P＜0.05)。 結(jié)論：已酮可可堿能有效抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)的新生大鼠心肌細(xì)胞產(chǎn)生TNT-α，并能有效減少