肺炎支原體肺炎患兒血清及誘導痰中IL-4及IFN-γ的測定.pdf

1、目的：肺炎支原體(Mycoplasma Pneumoniae,MP)是兒童呼吸道感染常見的病原體,肺炎支原體肺炎(Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia,MPP)是兒童呼吸道感染較常見的疾病,其發(fā)病率在嬰幼兒中有逐年升高的趨勢.迄今為止,肺炎支原體肺炎的發(fā)病機制仍不十分清楚,而免疫學機制,在MPP的發(fā)生發(fā)展中起重要作用.正常情況下,TH1/TH2通過分泌細胞因子,彼此調(diào)節(jié),相互制約,相對平衡,以維持正常的免疫狀態(tài)

2、.如果某些因素引起TH1/TH2失衡,則導致免疫功能紊亂,引起疾病的發(fā)生.臨床上通過測定細胞因子變化,將IL-4活性作為TH2功能指標,IFN-γ活性作為TH1功能指標,可間接反應TH亞群變化.目前國內(nèi)外關于MPP患兒血清IL-4/IFN-γ變化的研究甚少,而誘導痰中IL-4/IFN-γ變化的研究未見報道.支氣管誘導痰技術是近年開展的新的檢測手段,具有安全、有效、無創(chuàng)、重復性好、可靠性高等優(yōu)點,明顯優(yōu)于在小兒患者中難于開展且創(chuàng)傷性較大的

3、支氣管肺泡灌洗液(BALF).為此我們進行了MPP患兒血清及誘導痰中IL-4及IFN-γ的檢測,探討其在MPP免疫發(fā)病機制中的作用.實驗方法(1)血樣的采集:MPP患兒急性期38人、恢復期35人及正常對照組兒童20人于清晨分別采空腹靜脈血2.0ml,采血后立即以3000轉/分的速度離心5分鐘取血清,置-70℃冰箱內(nèi)保存待測.(2)誘導痰的采集:誘導痰液參照Pin等方法采集,MPP患兒急性期24人和恢復期20人,用3％的高滲鹽水超聲霧化吸

4、入,霧化時間不超過30分鐘,有痰時可隨時咳出到一清潔平皿中.選痰標本時,取棄去唾液符合標準的痰液約為1ml,加入中國醫(yī)科大學生產(chǎn)的等量痰液蓄積保護液,旋渦震蕩3-5分鐘使其成均勻狀態(tài),2000轉/分,4℃下離心10分鐘,取上清液,-70℃冰箱內(nèi)保存待測.(3)采用雙抗體夾心ELISA法檢測血清及誘導痰中IL-4及IFN-γ含量.3.統(tǒng)計學處理實驗結果均采用均值±標準差(x±s)來表示,組間比較采用t檢驗,用直線相關分析計算相關系數(shù),判定