體外培養(yǎng)人網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞分泌瘦素、脂聯(lián)素的研究.pdf

1、目的：通過(guò)體外培養(yǎng)人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞，并誘導(dǎo)分化為成熟脂肪細(xì)胞，研究這一過(guò)程中瘦素、脂聯(lián)素的分泌規(guī)律。 方法： 1、選擇擇期開腹手術(shù)病人，要求無(wú)全身代謝及內(nèi)分泌疾病，無(wú)服用干預(yù)糖及脂肪代謝的藥物史。年齡范圍(40±8)歲，體重指數(shù)(BMI)小于25kg/m<'2>。 2、采用膠原酶消化的方法分離培養(yǎng)人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞，通過(guò)對(duì)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、MTT比色法作細(xì)胞生長(zhǎng)曲線、油紅O脂肪染色抽提法對(duì)細(xì)胞鑒定，觀察原代培養(yǎng)人

2、前脂肪細(xì)胞增殖和分化過(guò)程。 3、分別在前脂肪細(xì)胞增殖過(guò)程、及21天的分化過(guò)程中收集細(xì)胞上清液。用酶聯(lián)免疫吸附法同批檢測(cè)所收集細(xì)胞上清液中瘦素和脂聯(lián)素蛋白含量。 4、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：分析結(jié)果用“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論： 1、成功建立了原代人網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞體外培養(yǎng)模型，為進(jìn)一步研究中心性肥胖及胰島素抵抗相關(guān)疾病提供了細(xì)胞學(xué)平臺(tái)。 2、在原代培養(yǎng)的人網(wǎng)膜脂肪細(xì)胞上，瘦素和脂聯(lián)素

3、呈現(xiàn)不同的分泌模式。其中，脂聯(lián)素可以作為鑒定前脂肪細(xì)胞分化成熟的特異性標(biāo)志。 3、不同階段、不同狀態(tài)的脂肪細(xì)胞，其分泌瘦素、脂聯(lián)素的功能有明顯差異。為研究肥胖患者體內(nèi)低脂聯(lián)素和高瘦素的分泌機(jī)制提供了實(shí)驗(yàn)室證據(jù)：即肥胖患者血中低脂聯(lián)素和高瘦素的特點(diǎn)可能與前脂肪細(xì)胞大小有關(guān)，而與其數(shù)量關(guān)系不是十分密切。 4、脂聯(lián)素可能存在自分泌的反饋抑制作用，且其分泌下調(diào)機(jī)制可能與分化有關(guān)，而與脂質(zhì)積聚關(guān)系不是十分密切，為其調(diào)節(jié)機(jī)制提供離體