脂聯(lián)素介導(dǎo)的脂肪積累調(diào)控研究.pdf

1、脂肪組織是生物體內(nèi)最大的儲能組織，而且也是十分活躍的脂肪代謝的主要器官。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，脂肪組織作為一個十分重要的內(nèi)分泌器官，能夠分泌許多細胞因子和細胞因子樣分子，如：瘦素（leptin）、脂聯(lián)素（adiponecan）、抵抗素（resistin）等脂肪細胞因子（adipocytokines）。這些脂肪細胞因子通過內(nèi)分泌或旁分泌方式對全身各器官系統(tǒng)功能具有重要調(diào)節(jié)作用，特別是參與調(diào)節(jié)與肥胖相關(guān)的胰島素抵抗和葡萄糖代謝紊亂。
　　

2、 成肌作用是一個復(fù)雜并受到高度調(diào)控的過程，包括細胞周期阻滯和肌肉特異性轉(zhuǎn)錄因子的表達。骨骼肌已經(jīng)被確定作為一個主要的糖代謝組織。肌細胞內(nèi)脂質(zhì)，作為一種重要的能量來源，在運動中提供線粒體氧化所需要的能量。越來越多的研究證明，肌細胞內(nèi)脂質(zhì)過度積累與胰島素抵抗明顯呈正相關(guān)。研究脂肪-骨骼肌之間的對話（crosstalk）對闡明骨骼肌胰島素抵抗的發(fā)生的機理有重要的意義。
　　 脂聯(lián)素是近年來新發(fā)現(xiàn)的一個脂肪細胞因子，脂聯(lián)素由脂肪細胞分

3、泌后進入血液，以多種形式在血液中循環(huán)。脂聯(lián)素球狀區(qū)在體內(nèi)獨立存在，與完整的脂聯(lián)素功能相似。脂聯(lián)素能夠促進肌肉脂肪酸氧化、降低血漿甘油三酯、通過增強胰島素的敏感性而促進葡萄糖代謝。
　　 本研究采用Real-Time PCR和細胞轉(zhuǎn)染等技術(shù)，研究了肌細胞成肌過程中細胞脂肪含量情況，脂聯(lián)素對該過程的影響，促卵泡生成素對AdipoR1的表達調(diào)控，豬APPL1和APPL2基因的克隆和生物學(xué)特性等進行了研究，結(jié)果如下：
　　 1．

4、以C2C12成肌細胞為研究模型，添加2％馬血清作為誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基，用油紅O染色的方法對C2C12在成肌過程細胞內(nèi)脂肪含量進行研究，發(fā)現(xiàn)在這個過程中，細胞內(nèi)脂肪含量急劇減少
　　 2．用Real-Time PCR的方法，研究了在C2C12成肌過程中，糖脂代謝相關(guān)基因以及脂聯(lián)素受體相關(guān)基因的mRNA表達模式，證明了C2C12成肌過程中，肌細胞脂肪含量的減少是由于脂肪酸氧化增加，合成減少導(dǎo)致；并發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素受體的表達模式與成肌過程有相關(guān)

5、性。
　　 3．用基因轉(zhuǎn)染的方法，證實脂聯(lián)素參與了成肌過程脂肪含量減少的過程，并證明了脂聯(lián)素通過增加脂肪酸氧化途徑，而不是水解和合成途徑參與上述過程。
　　 4．通過同源分析比較，以人的APPL1和APPL2基因序列為參照，運用RT-PCR的方法，獲得了豬APPL1和APPL2基因；以豬的心、肝、脾和肺等10個組織樣品作為研究材料，通過定量PCR分析獲得了豬APPL1和APPL2的組織表達譜；通過電子定位的方法進行APP