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文檔簡介
1、目的:采用高脂飲食制備大鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型,檢測血清脂聯(lián)素水平、肝組織脂聯(lián)素受體-2及相關(guān)指標(biāo),探討血清脂聯(lián)素及其受體-2在NAFLD發(fā)病中的作用。 方法:選用雄性SD大鼠30只,體重150g±10g,正常飼養(yǎng)1周后,將大鼠隨機(jī)分為正常對照組,高脂飲食組(模型組),每組15只。正常對照組給予標(biāo)準(zhǔn)飼料;高脂組在標(biāo)準(zhǔn)飼料基礎(chǔ)上添加10%豬油、2%
2、膽固醇。在實驗的第12周處死動物。處死前禁食10小時以上,稱重,麻醉后腹主動脈取血。取肝臟并稱濕重,計算肝指數(shù)(肝濕重/動物空腹體重),觀察肝臟的顏色、質(zhì)地,取部分肝組織固定于10%的中性甲醛溶液中以備HE染色,進(jìn)行組織學(xué)觀察,剪取少許肝組織測定肝臟脂聯(lián)素受體-2mRNA表達(dá)情況。用日本Olympus AU2700全自動生化分析儀檢測空腹血糖(fasting blood glLIcose,F(xiàn)BG)、甘油三酯(triglyceride,T
3、G)。用化學(xué)發(fā)光法測定空腹血清胰島素(fasting insulin,F(xiàn)INS)水平,按HOMA模型計算空腹?fàn)顟B(tài)下胰島素抵抗指數(shù)IRI=(FINS×FBG)/22.5。用ELISA法測定血清脂聯(lián)素濃度。HE染色觀察肝組織普通病理變化;組織學(xué)診斷非酒精性脂肪性肝病分類標(biāo)準(zhǔn)參照2006年及2002年中華醫(yī)學(xué)會肝臟病分會脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組制定的草案。用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈方法檢測肝臟脂聯(lián)素受體-2mRNA表達(dá)情況。 使用SPSSl3.
4、0統(tǒng)計軟件處理實驗數(shù)據(jù),所有數(shù)據(jù)以x±s表示,兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗,若P<0.05,則認(rèn)為兩組數(shù)據(jù)差異有顯著性。直線相關(guān)及多元線性回歸用于相關(guān)分析。 結(jié)論: 1.高脂飲食方法可成功制備出NAFLD大鼠模型。 2.血清脂聯(lián)素水平下降及肝臟脂聯(lián)素受體下調(diào)是NAFLD發(fā)病的主要因素。 3.肝臟脂聯(lián)素受體表達(dá)減少是NAFLD發(fā)病的獨立影響因素。 4.血清脂聯(lián)素水平下降及肝臟脂聯(lián)素受體下調(diào)引起NAFLD
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