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1、目的:分析中藥益智健腦顆粒干預(yù)前后P8品系快速老化小鼠(Senescence Accelerated Mouse P8,SAMP8)內(nèi)嗅區(qū)組織的差異蛋白質(zhì)表達(dá),從蛋白質(zhì)角度探討中藥益智健腦顆粒治療阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的作用機(jī)理。 方法:將6月齡SAMP8 30只隨機(jī)分為治療組(n=10)、模型組(n=10)和對(duì)照組(n=10),治療組以益智健腦顆粒濃縮液灌胃,模型組不予處理即處死,對(duì)照組以
2、等劑量雙蒸水灌胃。8周后,應(yīng)用雙向凝膠電泳(2-DE)技術(shù)分別分離治療組、模型組和對(duì)照組SAMP8內(nèi)嗅區(qū)組織總蛋白,膠體考馬斯亮藍(lán)染色,ImageScanner圖像掃描儀及ImageMaster雙向凝膠電泳軟件對(duì)圖像進(jìn)行掃描分析,將有意義的差異蛋白質(zhì)點(diǎn)經(jīng)基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)分析得到肽質(zhì)量指紋圖譜(PMF),經(jīng)MSDB和NCBInr數(shù)據(jù)庫(kù)查詢(xún),鑒定差異蛋白質(zhì)點(diǎn)。 結(jié)果 1.分別建立了
3、治療組、模型組和對(duì)照組SAMP8內(nèi)嗅區(qū)組織的2-DE圖譜。 2.比較分析3組SAMP8內(nèi)嗅區(qū)組織的 2-DE圖譜,發(fā)現(xiàn)治療組與模型組存在32個(gè)差異點(diǎn),其中12個(gè)在治療組表達(dá)上調(diào),9個(gè)表達(dá)下調(diào),7個(gè)只在治療組表達(dá),4個(gè)只在模型組表達(dá);治療組與對(duì)照組之間的差異點(diǎn)同上述兩組基本相似;而模型組與對(duì)照組無(wú)明顯差異。 3.鑒定了線粒體烏頭酸酶、NADH脫氫酶鐵硫蛋白6、電壓依賴(lài)性陰離子通道1等14個(gè)差異蛋白,根據(jù)蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)中提供的
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