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1、目的:研究環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2)與大鼠肝纖維化的關(guān)系以及選擇性抑制環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2)對(duì)大鼠肝纖維化影響.方法:實(shí)驗(yàn)大鼠分為正常對(duì)照組(正常組)、四氯化碳組(模型組)、四氯化碳+尼美舒利(nimesulide NS)組(實(shí)驗(yàn)組)、四氯化碳+γ-干擾素組(對(duì)照組).實(shí)驗(yàn)8周末稱量體重,股動(dòng)脈放血取血,取肝臟稱量肝重量,制備10%肝組織勻漿及肝臟病理組織切片.用全自動(dòng)生化儀檢測(cè)肝功能血清
2、學(xué)指標(biāo)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(asparagic acid aminotransferase AST);用放射免疫法檢測(cè)血清透明質(zhì)酸(hyaluronuc acid HA)、Ⅲ型前膠原肽(procollagen protein type Ⅲ PⅢP)、層粘連蛋白(laminin LN),生化法測(cè)定肝組織中羥脯氨酸(hydroxyproline HYP)的含量;肝臟
3、石蠟切片作HE染色及Von Gieson膠原染色進(jìn)行病理組織纖維化評(píng)分與炎癥分級(jí);免疫組化染色方法進(jìn)行α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin α-SMA)、環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2 COX-2)蛋白染色,利用PIPS-2020病理圖文分析系統(tǒng)測(cè)定陽(yáng)性表達(dá)面積;Western Blot免疫印跡法對(duì)COX-2蛋白進(jìn)行半定量分析.結(jié)論:1、大鼠化學(xué)性肝纖維化時(shí),其肝組織中COX-2蛋白表達(dá)明顯增高
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