TREM-1與銅綠假單胞菌感染和定植的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa, PA)作為醫(yī)院獲得性肺炎最常見的定植菌之一,其在呼吸道的粘附、定植是發(fā)生呼吸系統(tǒng)感染的必要條件。但長期以來氣道分泌物的采樣技術(shù)仍不能完全避免口咽部細(xì)菌污染,并且耗時長,臨床上對判斷痰培養(yǎng)檢出的PA是定植或感染甚為困難,臨床鑒別手段十分有限,故尋求一種快速、簡便、敏感的鑒別診斷指標(biāo)尤為重要。髓樣細(xì)胞觸發(fā)受體(triggering receptor expressed on

2、 myeloid cells-1,TREM-1)是近年來發(fā)現(xiàn)的診斷早期炎癥反應(yīng)的新指標(biāo),尤其在診斷感染性炎癥中有較高的敏感度和特異度,且與細(xì)菌感染的嚴(yán)重程度相關(guān)。本實驗通過研究TREM-1mRNA及血清sTREM-1在銅綠假單胞菌呼吸系統(tǒng)感染和定植不同狀態(tài)下的表達水平的變化,探討TREM-1與銅綠假單胞菌肺炎及呼吸道定植的相關(guān)性,從而為在病原學(xué)培養(yǎng)中病原菌為定植菌抑或致病菌的判斷提供理論及實驗依據(jù)、更好的早期感染預(yù)警、反應(yīng)臨床預(yù)后判斷及

3、指導(dǎo)抗生素的使用。
　　方法:
　　1.將SD大鼠按隨機原則分成肺部感染組、口咽部定植組及對照組。環(huán)甲膜穿刺注入銅綠假單胞菌(PA)菌液建立大鼠肺炎模型,定植組則由大鼠口、鼻腔內(nèi)注入PA菌液,并將環(huán)甲膜穿刺注入無菌生理鹽水作為對照,并于建模后第3、9、24小時分別隨機抽取并予以處死后收集標(biāo)本。
　　2.收集各組不同時間點處死的大鼠血液,以ELISA法檢測血清中sTREM-1、CRP和PCT的水平;采用PCR法檢測肺組織

4、中TREM-1 mRNA的表達水平;肺組織病理切片比較炎癥的范圍及程度,同時行肺組織勻漿菌落計數(shù),定植組加行咽拭子細(xì)菌培養(yǎng)。
　　3.應(yīng)用SPSS軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,數(shù)據(jù)采用X+S表示。組間比較采用單因素方差分析,sTREM-1與CRP、PCT線性相關(guān)采用Pearson相關(guān)分析。
　　結(jié)果:
　　1.感染組各時間點大鼠肺組織中TREM-1 mRNA的表達水平較定植組及對照組均有明顯的增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.

5、05),其中細(xì)菌接種3小時后TREM-1 mRNA的表達就有升高,9小時達到高峰,24小時開始回落。定植組與對照組TREM-1 mRNA表達比較沒有顯著差異。
　　2.感染組各時間點大鼠血清中sTREM-1、CRP和PCT的水平較定植組及對照組均有明顯的增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。其中sTREM-1、CRP及PCT水平在3小時開始上升,9小時升高到峰值,24小時后下降。相關(guān)性分析中sTREM-1和CRP、PCT均成正相

6、關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.86和0.75。
　　3.感染組大鼠肺組織病理改變在9小時最為嚴(yán)重,炎癥范圍廣,程度重,3、24小時與之相比均較輕,而定植組和對照組的肺泡及肺間質(zhì)結(jié)構(gòu)基本正常,無明顯出血、炎細(xì)胞浸潤;感染組肺組織均培養(yǎng)出銅綠假單胞菌,肺組織勻漿菌落計數(shù)均>105CFU/g,定植組和對照組肺組織均未培養(yǎng)出細(xì)菌,定植組咽拭子細(xì)菌培養(yǎng)均有呼吸道正常菌群及銅綠假單胞菌生長。
　　結(jié)論:
　　1.銅綠假單胞菌肺部感染其肺組

7、織TREM-1 mRNA和血清sTREM-1表達明顯增高,且與咽部定植和對照組存在明顯差異。TREM-1的檢測有助于銅綠假單胞菌感染與定植的鑒別。
　　2.銅綠假單胞菌肺部感染肺組織TREM-1 mRNA和血清sTREM-1表達水平與肺部炎癥的程度有關(guān),TREM-1的檢測對感染性疾病預(yù)后判斷有指導(dǎo)意義。
　　3.銅綠假單胞菌肺炎血清 sTREM-1和炎癥指標(biāo) CRP,PCT水平變化呈高度正相關(guān),sTREM-1在銅綠假單胞菌感