引起呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎銅綠假單胞菌的耐藥機(jī)制研究.pdf

1、目的：1、研究高齡患者呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎的病原菌分布及耐藥情況。2、探討引起呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎的銅綠假單胞菌耐藥機(jī)制。3、對(duì)多藥耐藥銅綠假單胞菌進(jìn)行體外聯(lián)合藥敏試驗(yàn)，為臨床合理用藥提供依據(jù)。
　　方法：
　　1、收集2007年1月～2011年6月診斷為VAP的高齡患者123例，研究其病原菌分布及耐藥情況。
　　2、將兩周之內(nèi)，同一患者且對(duì)某一類抗菌藥物藥敏有變化的兩株銅綠假單胞菌配為一對(duì)，其中碳青霉烯類20對(duì)，喹諾酮類22

2、對(duì)，氨基糖苷類15對(duì)，多粘菌素B10對(duì)。收集來(lái)自30個(gè)高齡VAP患者的PA122株。
　　3、瓊脂稀釋法檢測(cè)PA對(duì)14種抗生素的MIC、外排泵表型。PFGE法檢測(cè)基因同源性。雙紙片協(xié)同法檢測(cè)金屬酶表型。PCR法檢測(cè)耐藥基因。結(jié)晶紫染色法檢測(cè)細(xì)菌生物被膜形成能力。掃描電鏡觀察生物被膜。棋盤法設(shè)計(jì)，瓊脂稀釋法行體外聯(lián)合藥敏。
　　結(jié)果：
　　1、123例高齡老年VAP患者共檢出細(xì)菌409株，其中革蘭氏陰性菌355株，革蘭氏

3、陽(yáng)性菌54株，革蘭陰性菌中銅綠假單胞菌24.44％、鮑曼不動(dòng)桿菌17.11％、嗜麥芽窄食單胞14.67％、洋蔥伯克霍爾德菌7.58％；革蘭陽(yáng)性菌中以金黃色葡萄球菌9.05％為主。銅綠假單胞菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥性較高。
　　2、所收集的配對(duì)PA菌株共來(lái)自30個(gè)患者，其中70％的患者痰標(biāo)本分離的配對(duì)菌株經(jīng)PFGE證明為同一基因來(lái)源，30％的患者痰標(biāo)本分離的配對(duì)菌株經(jīng)PFGE證明為不同基因來(lái)源。
　　3、4個(gè)患者共8株菌擴(kuò)增出O

4、XA-1基因，3個(gè)患者共6株菌擴(kuò)增出OXA-10基因，僅一個(gè)患者1株菌擴(kuò)增出GES基因，13個(gè)患者共33株菌擴(kuò)增出OprD2基因，余菌株為OprD2基因缺失或部分缺失菌株。未擴(kuò)增出KPC、GIM、OXA-2、VIM及IMP耐藥基因。同一患者來(lái)源且經(jīng)PFGE證明為同一基因來(lái)源的菌株中，PCR法檢測(cè)其耐藥基因型如OXA-1、OXA-10、GES、OprD2并不完全一致。僅有一個(gè)患者分離的共4株菌金屬酶表型陽(yáng)性。5個(gè)患者共9株菌外排泵表型陽(yáng)性