幽門螺桿菌感染與胃黏膜上皮細胞TGF-β1及B7-H1表達的研究.pdf

1、目的:探討不同菌量幽門螺桿菌(H． pylori)對體外感染胃黏膜上皮細胞轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF—β1)、B7—H1 mRNA表達的影響及其誘導(dǎo)TGF—β1表達的菌體因素，為支持H．pylori通過誘導(dǎo)胃黏膜上皮細胞表達TGF—β1及B7—H1，抑制宿主免疫功能，參與H． pylori免疫逃逸提供依據(jù)。 方法:①選用1.0×109CFU/ml(低濃度)，4.0×109CFU/ml(中濃度)，8.0×109CFU/ml(高濃度

2、)H． pylori國際標準毒力菌株NCTC11637活菌懸液分別感染體外培養(yǎng)胃黏膜上皮細胞，建立不同共孵育時間(0h、0.5h、1h、1.5h、2h、4h、8h、12h)H． pylori體外感染細胞模型，設(shè)立未加H． pylori的胃黏膜上皮細胞對照組，以酶鏈免疫吸附法(ELISA)檢測感染及對照細胞各時間點培養(yǎng)上清TGF—β1含量，原位雜交法檢測不同濃度感染及對照細胞共培養(yǎng)12 h B7—H1 mRNA的表達；②同時用H．pylo

3、ri中濃度滅活菌懸液與體外培養(yǎng)胃黏膜細胞共孵育，測定共孵育細胞2h、12h培養(yǎng)細胞上清的TGF—β1含量。③用超聲粉碎并經(jīng)離心獲取的H．pylori菌體成分上清、沉淀以及煮沸后上清、沉淀分別作用體外培養(yǎng)胃黏膜細胞，測定2h、12h培養(yǎng)細胞上清TGF—β1含量。 結(jié)果:①H．pylori活菌懸液三種濃度各時間組胃黏膜上皮細胞培養(yǎng)上清TGF—β1含量均較對照組明顯增高(P＜0.05)，各濃度時間組TGF—β1表達量有相似的動態(tài)趨勢

4、，但尤以中濃度組TGF—β1表達量最高(P＜0.05)；②中濃度H． pylori滅活菌株組與同濃度活菌組細胞培養(yǎng)上清TGF—β1含量差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；③H．pylori菌體成分上清組較對照組和沉淀組細胞培養(yǎng)上清TGF—β1表達增高(P＜0.05)；上清煮沸組較未煮沸組明顯降低(P＜0.05)；沉淀煮沸組與未煮沸組差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。④高、中、低濃度組感染細胞12h B7—H1 mRNA的表達均較對照組增高

5、(P＜0.05)，以中濃度組表達最高，并與高、中、低濃度組12 h感染細胞上清TGF—β1含量呈正相關(guān)(rs=0.628，P＜0.01)。 結(jié)論: H． pylori可直接誘導(dǎo)胃黏膜上皮細胞分泌TGF—β1，其誘導(dǎo)因素為可溶性不耐熱菌體成分；H．pylori同樣可誘導(dǎo)胃黏膜上皮細胞B7—H1mRNA表達增高，且B7—H1mRNA表達與TGF—β1存在正相關(guān)。推測H．pylori通過誘導(dǎo)TGF—β1、B7—H1高表達，抑制宿主免