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文檔簡介
1、Wnt信號通路控制多種細(xì)胞的命運(yùn),參與細(xì)胞的增殖、分化、凋亡等基本過程,在正常組織發(fā)育以及腫瘤形成中都起著非常重要的作用。經(jīng)典Wnt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,通過關(guān)鍵因子β-catenin(果蠅中為Armadillo)對靶基因轉(zhuǎn)錄進(jìn)行調(diào)控。WNT信號存在的情況下,β-catenin進(jìn)入核內(nèi),與TCF結(jié)合,并募集許多轉(zhuǎn)錄激活相關(guān)因子,從而激活靶基因轉(zhuǎn)錄。pygopus通過PHD與Lgs/BCL9直接結(jié)合,并由此與β-catenin的N端間接結(jié)合。目前
2、已經(jīng)證實(shí)β-catenin與某些組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶(HMT)復(fù)合體成員有關(guān),并且這種相互作用是β-catenin參與Wnt靶基因轉(zhuǎn)錄激活的關(guān)鍵機(jī)制。染色體重組相關(guān)蛋白復(fù)合體HMT可以對組蛋白尾部氨基酸殘基進(jìn)行甲基化修飾,這些修飾可以影響組蛋白與DNA的親和性,從而改變?nèi)旧w的結(jié)構(gòu),使其處于相對松弛的狀態(tài),以便于轉(zhuǎn)錄因子與DNA的結(jié)合及其它蛋白質(zhì)因子的相互作用。本實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)通過串聯(lián)親和層析(Tandem AffinityPurificat
3、ion,TAP)技術(shù)發(fā)現(xiàn)了若干與Pygopus2的N端存在相互作用的蛋白,其中包括一些H3K4 HMT蛋白復(fù)合體的成員。本文采用RNA干擾技術(shù)、GST-PULL DOWN、免疫共沉淀及蛋白免疫印跡技術(shù),對Pygopus2的N端與多個HMT蛋白之間的相互作用進(jìn)行鑒定和分析,確定人Pygopus2的NHD結(jié)構(gòu)域與多個HMT/HAT復(fù)合體組分存在相互作用,其中包括HMT復(fù)合體組分WDR5、RbBP5、ASH2L、MLL2、Menin,并進(jìn)一步
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