異丙酚對新生大鼠腦發(fā)育的影響.pdf

1、目的：探討單次和多次異丙酚麻醉對新生大鼠腦發(fā)育的影響及可能機制。 方法：7日齡SD大鼠60只隨機分為三組（n=20只），雌雄各半：對照組（C組）腹腔注射生理鹽水7.5ml/kg，1次/d，連續(xù)7 d；異丙酚單次注射組（PI組）腹腔注射生理鹽水7.5ml/kg，1次/d，連續(xù)6d，第7天腹腔注射異丙酚75 mg/kg；異丙酚多次注射組（P2組）腹腔注射異丙酚75 mg/kg，1次/d，連續(xù)7d。于第7天注射后3h，各組隨機抽取2只

2、，斷尾取血，測定血糖；注射后5h，各組隨機抽取6只，免疫組化方法測定海馬CA1區(qū)caspase-3表達水平。其余喂養(yǎng)2周后進行水迷宮實驗，測試空間學習記憶功能。水迷宮實驗結(jié)束后，高效液相色譜法檢測皮層和海馬組織天門冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸及γ-氨基丁酸含量，并在光鏡下觀察海馬CA1區(qū)錐體細胞的形態(tài)及缺失情況。 結(jié)果： 1、各組SpO2、血糖水平均在正常范圍內(nèi)，體重無明顯差異。 2、免疫組化結(jié)果顯示，胞漿棕黃色顆粒為

3、caspase-3陽性表達。對照組海馬CA1區(qū)有少量caspase-3表達；與對照組比較，單次和多次異丙酚注射組的表達均有不同程度的增高（P<0.05）；異丙酚多次注射組與異丙酚單次注射組比較，caspase-3表達也明顯增加（P<0.05）。 3、高倍顯微鏡下觀察海馬CA1區(qū)的病理學的改變。對照組（C組）反映了正常幼年大鼠海馬CA1區(qū)錐體細胞的排列結(jié)構(gòu)及形態(tài)。與C組比較，異丙酚單次注射組（P1組）錐體細胞層結(jié)構(gòu)較清楚，細胞形態(tài)

4、無明顯改變，胞漿呈藍色，為Nissl體陽性反應；而異丙酚多次注射組（P2組）細胞層結(jié)構(gòu)紊亂，錐體細胞明顯固縮，體積減小，細胞明顯缺失。海馬CA1區(qū)神經(jīng)細胞計數(shù)，與C組比較，P1組和P2組細胞數(shù)均有不同程度下降（P<0.05）；P2組與P1組比較，細胞也明顯減少（P<0.05）。 4、高效液相色譜法檢測結(jié)果顯示，對照組（C組）氨基酸含量反映了同齡大鼠腦組織氨基酸的基礎水平。與C組和P1組比較，P2組海馬天門冬氨酸含量降低，皮層和海

5、馬谷氨酸含量、谷氨酸/γ-氨基丁酸比值均明顯下降（P<0.05）；甘氨酸和γ-氨基丁酸含量差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。P1組和C組比較，皮層和海馬氨基酸含量差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。 5、水迷宮測試結(jié)果顯示，單次注射異丙酚對新生鼠幼年期學習記憶功能影響不明顯。異丙酚多次注射組（P2組）的逃逸潛伏期、尋臺路徑長度較對照組（C組）和異丙酚單次注射組（P1組）明顯延長，探索時間和穿越平臺區(qū)的次數(shù)則明顯減少（P<0.05）

6、。游泳速度各組間差異無統(tǒng)計學意義。 結(jié)論： 1、單次或多次注射異丙酚會引起新生大鼠海馬神經(jīng)細胞凋亡增加，致使其幼年期神經(jīng)細胞不同程度的丟失，且反復多次注射異丙酚還會導致神經(jīng)細胞形態(tài)改變，細胞層結(jié)構(gòu)紊亂。 2、反復多次注射異丙酚可干擾新生大鼠成長至幼年時腦組織的基礎氨基酸水平，改變谷氨酸/γ-氨基丁酸平衡。 3、反復多次注射異丙酚可導致新生大鼠幼年期學習、記憶功能下降，這可能與神經(jīng)細胞過度凋亡所致神經(jīng)細胞缺