異丙酚復(fù)合淺低溫對(duì)大鼠腦創(chuàng)傷后神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、背景和目的：腦創(chuàng)傷后繼發(fā)損傷可造成腦組織結(jié)構(gòu)與功能的進(jìn)一步損傷，是導(dǎo)致顱腦損傷病人死亡或功能障礙的重要原因之一。神經(jīng)細(xì)胞凋亡是腦創(chuàng)傷后細(xì)胞死亡的重要原因之一，減少腦創(chuàng)傷后細(xì)胞凋亡，有利于患者的恢復(fù)提高生存質(zhì)量。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀(guān)察異丙酚復(fù)合淺低溫治療后Bax及Bcl-2mRNA水平和蛋白表達(dá)的變化，探討異丙酚復(fù)合淺低溫對(duì)大鼠腦創(chuàng)傷后神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。 方法：采用Feeney's腦創(chuàng)傷模型。健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為5組：假手術(shù)組(S)

2、、模型組(M)、淺低溫組(H)、異丙酚組(P)、異丙酚復(fù)合淺低溫組(PH)，每組分24小時(shí)和48小時(shí)兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各8只動(dòng)物。S組，只顱骨開(kāi)窗不致傷；M組，制作大鼠腦創(chuàng)傷模型；H組，創(chuàng)傷15分鐘后，采用物理降溫法，大鼠體溫控制在32～34℃(肛溫)，維持3小時(shí)；P組，創(chuàng)傷后立即按50mg/kg腹腔注射異丙酚，一小時(shí)后追加全量。H組，既控制性降溫，又腹腔注射異丙酚。腦創(chuàng)傷后采用干濕重法測(cè)量大鼠腦水含量，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-P

3、CR)技術(shù)來(lái)檢測(cè)Bcl-2和Bax在mRNA水平變化。另取80只大鼠，分組同上，采用原位缺口末端標(biāo)記(TUNEL)法檢測(cè)創(chuàng)傷皮層周?chē)窠?jīng)細(xì)胞凋亡情況，采用免疫組化技術(shù)來(lái)檢測(cè)Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)的變化。 結(jié)果：(1)大鼠腦創(chuàng)傷后傷側(cè)24h、48h腦水含量明顯增加，異丙酚復(fù)合淺低溫能顯著降低腦水含量；(2)S組偶見(jiàn)TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)；而M組創(chuàng)傷灶周?chē)鶷UNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目顯著增多；與M組比較，H組、P組TUNEL細(xì)胞數(shù)目明

4、顯降低(p＜0.01)；與M、H、P三組分別比較，異丙酚復(fù)合淺低溫組TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)均顯著降低(p＜0.01)；(3)S組可見(jiàn)大量Bcl-2蛋白免疫陽(yáng)性細(xì)胞；M組Bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目明顯減少；與M組比較，H組、P組Bcl-2蛋白免疫陽(yáng)性細(xì)胞明顯增加(p＜0.05)，異丙酚復(fù)合淺低溫組顯著增加(p＜0.01)；(4)S組皮層可見(jiàn)散在Bax蛋白免疫陽(yáng)性細(xì)胞；而在M組，Bax陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目顯著增加；與M組比較，H組、P組Bax陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目

5、明顯減少(p＜0.05)；與M組比較，異丙酚復(fù)合淺低溫組Bax陽(yáng)性細(xì)胞顯著減少(p＜0.01)，而和P組、H組比較，也明顯減少(p＜0.05、p＜0.01)；(5)S組可見(jiàn)Bcl-2mRNA表達(dá)；而M組Bcl-2mRNA表達(dá)顯著減少(p＜0.01)；與M組比較，H組、P組Bcl-2mRNA明顯增加(p＜0.05)，PH組Bcl-2mRNA表達(dá)顯著增加(p＜0.01)；(6)S組可見(jiàn)很少量BaxmRNA表達(dá)；而在M組BaxmRNA水平顯著

6、增加；和M組比較，H組、P組BaxmRNA水平明顯降低(p＜0.05，p＜0.01)；PH組BaxmRNA表達(dá)比M組顯著降低(p＜0.01)；而和P組、H組比較也明顯降低(p＜0.05，p＜0.01)。 結(jié)論： (1)腦創(chuàng)傷后大鼠腦水含量增加，創(chuàng)傷灶周?chē)蛲錾窠?jīng)細(xì)胞顯著增加，BaxmRNA水平和蛋白表達(dá)明顯升高，Bcl-2mRNA水平和蛋白表達(dá)明顯降低。(2)異丙酚能能降低創(chuàng)傷后腦水含量，并顯著減少腦創(chuàng)傷后神經(jīng)細(xì)胞凋亡的