慢性心力衰竭大鼠的心臟交感神經(jīng)重構(gòu)及Carvedilol的保護(hù)作用研究.pdf

1、第一部分阿霉素誘導(dǎo)大鼠慢性心力衰竭模型建立及評(píng)價(jià)
　　 目的：建立阿霉素誘導(dǎo)的慢性心力衰竭(CHF)大鼠動(dòng)物模型，并對(duì)大鼠心功能和心肌超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　 方法：30只成年雄性清潔級(jí)Wistar大鼠，隨機(jī)分為心力衰竭組(CHF組，n=24)和正常對(duì)照組(NC組，n=6)；CHF組給予阿霉素2mg/kg，腹腔注射，前5次為每3天注射，后5次每7天注射，累計(jì)用量為20mg/kg，對(duì)照組應(yīng)用生理鹽水同樣方法注射，兩組均正常

2、飲食喂養(yǎng)；第2、4、6、8周末在CHF組隨機(jī)各抽取2只大鼠做超聲心動(dòng)圖心功能分析和心肌超微病理分析；第10周末應(yīng)用超聲心動(dòng)圖檢測剩下大鼠心功能指標(biāo)；取腔靜脈血測定血漿去甲腎上腺素(NE)水平；取左室游離壁心肌，電子顯微鏡評(píng)價(jià)大鼠心肌超微結(jié)構(gòu)。
　　 結(jié)果：CHF組用藥4周后即存在心肌開始出現(xiàn)線粒體水腫，心肌間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤，第6周出現(xiàn)心肌肥厚，10周后大鼠心肌明顯出現(xiàn)線粒體水腫、嵴斷裂、核溶解、心肌間質(zhì)纖維化和心腔擴(kuò)大、心室壁變

3、??；第10周末CHF組大鼠左心室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)及收縮末期內(nèi)徑(LVESD)明顯增加[(0.58±0.07)vs (0.45±0.05)和 (0.23±0.03)vs (0.05±0.006)，P＜0.05和 P＜0.01]，左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)和左心室短軸縮短率(LVFS)明顯降低[(72.4±2.77)vs (93.51±4.74)和 (37.72±5.43)vs (62.21±7.62)，均P＜0.05]；CHF組

4、大鼠靜脈血漿NE水平明顯高于NC組(13.94±9.61 vs 61.52±21.44，P＜0.01)。
　　 結(jié)論：阿霉素多次腹腔注射可以導(dǎo)致大鼠心肌類似于人類原發(fā)性擴(kuò)張型心肌病的病理和病理生理改變；用阿霉素多次腹腔注射的方法制作CHF動(dòng)物模型，可靠性和可行性好。
　　 第二部分慢性充血性心力衰竭大鼠心肌腎上腺素能受體表達(dá)的變化及Carvedilol治療的影響
　　 目的：評(píng)價(jià)慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌腎上

5、腺素受體(Ars)表達(dá)水平的變化及carvedilol治療對(duì)Ars mRNA表達(dá)的影響。
　　 方法：42只Wistar雄性大鼠隨機(jī)分成4組，即正常對(duì)照組(NC組，n=6)、CHF carvedilol治療組(CHF-C組，n=12)、CHF metoprolol治療組(CHF-M組，n=12)和CHF安慰劑治療組(CHF-P組，n=12)；應(yīng)用阿霉素腹腔注射的方法制作CHF大鼠CHF模型；聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)方法測定大鼠心

6、肌Ars mRNA表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：⑴和正常對(duì)照組相比，CHF-P組和CHF-M組大鼠心肌α1A-AR mRNA表達(dá)量明顯升高(0.55±0.16 vs 0.32±0.09和 0.48±0.14 vs 0.32±0.09，P<0.05)；CHF-C組大鼠心肌α1A-AR mRNA表達(dá)量明顯低于CHF-P組(0.34±0.08 vs0.55±0.16，P<0.05)，而與NC組無明顯差異(0.34±0.08 vs 0.32±

7、0.09，P>0.05)；⑵CHF-P組大鼠心肌β1-AR mRNA表達(dá)水平明顯低于NC組(0.68±0.18 vs 0.96±0.21，P<0.01)，CHF-C組和CHF-M組大鼠心肌β1-AR mRNA表達(dá)水平明顯高于CHF-P組(0.83±0.18 vs 0.68±0.18和0.78±0.19 vs 0.68±0.18，P<0.05)；⑶四組大鼠心肌β2-AR mRNA表達(dá)量無明顯差異(均P>0.05)；⑷CHF-C組大鼠心肌β

8、3-AR mRNA表達(dá)量明顯低于CHF-P組(0.30±0.09 vs 0.47±0.13，P<0.05)，CHF-M組大鼠心肌β3-AR mRNA表達(dá)量和CHF-P組比較，無明顯差異；⑸CHF-C組大鼠心肌α1A/β1和β3/β1比值與NC組更接近。
　　 結(jié)論：⑴CHF大鼠α1A-，β1-，β2-和β3-AR表達(dá)水平出現(xiàn)明顯異常，主要表現(xiàn)為CHF心肌β1-AR表達(dá)明顯下調(diào)和α1A-AR、β3-AR明顯上調(diào)；⑵carvedil

9、ol 治療可使β1-AR水平明顯上調(diào)，α1A-AR和β3-AR表達(dá)水平明顯下調(diào)，使Ars更接近于正常分布比例，可能有助于改善CHF心肌腎上腺素能受體分布。
　　 第三部分慢性心力衰竭大鼠心肌交感神經(jīng)活性改變及Carvedilol治療的影響
　　 目的：測定Carvedilol治療后慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌神經(jīng)生長因子(NGF)及酪氨酸羥化酶(TH)表達(dá)水平，以評(píng)價(jià)Carvedilol對(duì)CHF大鼠心臟交感神經(jīng)活性的影

10、響。
　　 方法：選42只雄性清潔級(jí)Wistar大鼠，隨機(jī)分為慢性心力衰竭組(CHF組，n=36)和正常對(duì)照組(NC組，n=6)；應(yīng)用阿霉素腹腔注射的方法制作CHF模型，將CHF大鼠組隨機(jī)分成Carvedilol治療組(CHF-C組，n=9)、Metoprolol治療組(CHF-M組，n=9)、特拉唑嗪治療組(CHF-T組，n=9)和安慰劑治療組(CHF-P組，n=9)；阿霉素腹腔注射第5周起，CHF-C組接受Carvedilo

11、l灌胃治療(0.25mg/kg/d)，CHF-M組接受metoprolol灌胃治療(0.25mg/kg/d)，CHF-T組接受特拉唑嗪治療(0.4mg/kg/d)，CHF-P組用淀粉作安慰劑治療，療程6周；高效液相色譜法測定大鼠血漿NE水平；RT-PCR和Western blot方法檢測心肌NGF和TH表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：⑴ CHF-P組大鼠心肌NGF mRNA和蛋白表達(dá)水平比正常對(duì)照組明顯下降(0.69±0.17 vs 1

12、.63±0.30和0.52±0.09 vs 1.10±0.29，均 P＜0.01)；⑵CHF-C組NGF mRNA和蛋白的表達(dá)明顯高于CHF-P組(1.01±0.28 vs 0.69±0.17和0.84±0.24 vs 0.52±0.09，均 P＜0.05)；⑶CHF-T組NGF mRNA和蛋白表達(dá)明顯高于CHF-P組(0.94±0.23 vs 0.69±0.17和0.81±0.18 vs 0.52±0.09，均 P＜0.05)；⑷CH

13、F-M組NGF mRNA和蛋白與CHF-P組無明顯差異(0.77±0.20 vs 0.69±0.17和 0.53±0.12 vs 0.52±0.09，均 P＞0.05)；⑸CHF-P組大鼠心肌TH mRNA和蛋白表達(dá)水平比正常對(duì)照組明顯下降(0.94±0.28 vs 1.78±0.49和0.86±0.24 vs 1.42±0.41，均 P＜0.01)；⑹CHF-C組TH mRNA和蛋白的表達(dá)明顯高于CHF-P組(1.36±0.39 vs

14、 0.94±0.0.28和 1.10±0.37 vs 0.86±0.24，均 P＜0.05)；⑺CHF-T組NGF mRNA和蛋白表達(dá)明顯高于CHF-P組(1.19±0.0.30 vs 0.94±0.28和0.99±0.30 vs 0.86±0.24，均 P＜0.05)；⑻CHF-M組TH mRNA和蛋白與CHF-P組無明顯差異(0.97±0.30 vs 0.94±0.28和 0.90±0.31 vs 0.86±0.24，均 P＞0.0