腦內(nèi)氧化應激參與心力衰竭時交感神經(jīng)興奮的研究.pdf

1、研究背景：
　　 最近的流行病學調(diào)查表明，我國心力衰竭患病率呈逐年上升趨勢，且有臨床癥狀的患者5年存活率與惡性腫瘤相似。如何有效的延緩心力衰竭的發(fā)病率和病死率已經(jīng)迫在眉睫，因此，探討心衰的發(fā)生發(fā)展機制是目前研究的熱點課題。
　　 20世紀90年代以來，認識到心力衰竭發(fā)生發(fā)展過程中交感神經(jīng)系統(tǒng)和腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)相互作用，引起多種內(nèi)源性的神經(jīng)內(nèi)分泌和細胞因子的激活，其激活又促進心肌重構，加重心衰，從而形成惡性循環(huán)

2、。21世紀初以來，β受體阻滯劑成為了心力衰竭治療指南的基礎用藥。充分說明了交感神經(jīng)系統(tǒng)在心衰發(fā)生發(fā)展中的發(fā)揮重要作用。
　　 心力衰竭發(fā)生后即刻，一方面，外周交感神經(jīng)系統(tǒng)代償性的興奮性增高通過正向的變時、變力、變傳導，來維持心輸出量；另一方面，交感神經(jīng)系統(tǒng)興奮性的增強表現(xiàn)為血漿去甲腎上腺素水平的升高，其水平越高預后越差，血漿去甲腎上腺素水平是心力衰竭患者死亡率的獨立預測因素；心力衰竭時交感神經(jīng)激活程度直接與病人的預后密切相關。因

3、此降低交感神經(jīng)興奮性成為治療心衰的關鍵因素之一。
　　 有報道表明，中樞神經(jīng)激素系統(tǒng)的激活與心血管中樞活動增強密切相關，并可以明顯改變外周交感神經(jīng)的活動。Kang等人發(fā)現(xiàn)，心衰時下丘腦室旁核區(qū)活性氧簇和炎性細胞因子（如TNF-α和IL-1β）表達增加，氧化應激加強，并伴有外周交感神經(jīng)活動增加，血漿去甲腎上腺素含量增加。NADPH氧化酶是人體內(nèi)生成氧自由基的途徑之一。Francis等人發(fā)現(xiàn)，活性氧簇含量增加與交感神經(jīng)活動之間存在一

4、定的聯(lián)系。然而，中樞氧化應激引起心衰時交感神經(jīng)興奮的具體調(diào)控機制尚不十分清楚。
　　 據(jù)此我們推測：心衰大鼠下丘腦室旁核內(nèi)NADPH氧化酶的激活誘導活性氧簇生成增加進而引起交感神經(jīng)興奮性增強，參與心衰的發(fā)生發(fā)展。
　　 目的：
　　 觀察心衰大鼠室旁核中NADPH氧化酶活性亞單位gp91Phox和活性氧簇的表達情況，以及NADPH氧化酶與交感神經(jīng)活動的關系，以探討腦內(nèi)氧化應激在慢性心力衰竭時對交感神經(jīng)活動的影響。

5、
　　 方法：
　　 健康成年雄性SD大鼠(250±30)g，隨機分為四組：Sham+aCSF組、Sham+APO組、HF+aCSF組、HF+APO組。采用左冠狀動脈前降支結(jié)扎術致心肌梗死制備大鼠心衰模型，對照組(SHAM)大鼠只穿線不結(jié)扎，隨后用微型滲透壓泵經(jīng)側(cè)腦室連續(xù)四周給予NADPH氧化酶抑制劑apocynin(10μg/hr)或人工腦脊液干預(aCSF,0.25μl/hr)。四周后，通過高效液相色譜法檢測血漿去甲

6、腎上腺素可明確各組大鼠交感神經(jīng)活動情況；免疫熒光染色觀察下丘腦室旁核gp91Phox和IL-1β的表達；DHE染色觀察室旁核活性氧簇的變化并與交感神經(jīng)活動情況作對比，從而研究中樞NADPH氧化酶和活性氧簇的變化對交感神經(jīng)活動的影響；ELISE法測定血漿和下丘腦IL-1β含量以明確中樞給藥對外周和下丘腦炎性細胞因子的影響；并測定全心/體重、肺/體重的變化。
　　 結(jié)果：
　　 與假手術對照組相比，心衰模型組大鼠血漿去甲腎上

7、腺素水平明顯升高（P＜0.05），下丘腦室旁核gp91phox表達增加、活性氧簇產(chǎn)生增加(P＜0.05)，下丘腦和血漿IL-1β含量明顯增加(P＜0.05)，全心/體重比(WH/BW)和肺/體重比(LW/BW)明顯增加(P＜0.05)。側(cè)腦室持續(xù)給予apocynin后，血漿去甲腎上腺素含量有所降低（P＜0.05），室旁核gp91phox蛋白表達有所降低、活性氧簇生成有所減少（P＜0.05），下丘腦IL-1β含量不具有統(tǒng)計學意義，血漿IL