蘆筍黃酮對(duì)D-半乳糖衰老小鼠的抗氧化作用研究.pdf

1、蘆筍(Asparagus officinalis Linne)學(xué)名石刁柏，又名龍須菜，屬百合科(Liliaceae)植物，含有豐富的類黃酮化合物蘆丁(Rutin)。類黃酮是藥用植物中的主要活性物質(zhì)之一，具有抗炎癥、免疫調(diào)節(jié)活性、抗腫瘤、調(diào)節(jié)血脂、抗氧化、自由基清除、抗病毒等多種生物活性。近年來(lái)，關(guān)于蘆筍的開(kāi)發(fā)和利用受到人們的廣泛關(guān)注。 本研究采用超聲波法和索式抽提法提取蘆筍總黃酮，按照60％、70％、80％、90％四個(gè)乙醇溶液梯

2、度提取。單波長(zhǎng)法測(cè)定，檢測(cè)波長(zhǎng)510nm。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，超聲波法提取總黃酮的穩(wěn)定性的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)在3.75％～6.15％之間，而索氏提取法提取總黃酮的穩(wěn)定性的RSD在1.08％～3.44％之間；超聲波法提取總黃酮的重復(fù)性的RSD在1.34％～3.26％之間，索氏提取法提取總黃酮的重復(fù)性的RSD在2.19％～4.95％之間；在回收率方面，兩種方法提取的黃酮回收率均在97.90％～106.6％范圍內(nèi)。從穩(wěn)定性、重復(fù)性、回收率來(lái)看，

3、這兩種提取方法結(jié)果準(zhǔn)確可靠，均可用于后續(xù)試驗(yàn)。而從黃酮提取的得率來(lái)看，80％乙醇濃度索氏提取法所得黃酮的得率最高，達(dá)到了5.305mg/g的得率，即每克蘆筍干粉可得黃酮類物質(zhì)5.305mg黃酮。因此，確定本實(shí)驗(yàn)提取黃酮采用索氏提取法，提取溶劑為80％乙醇溶液，提取時(shí)間為回流提取6h。 通過(guò)研究黃酮對(duì)LPS刺激體外培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞RAW264.7產(chǎn)生NO的量，進(jìn)一步證實(shí)黃酮清除自由基、抗氧化的效果。LPS與黃酮同時(shí)加入共培養(yǎng)72h，

4、只有黃酮400μg/ml、800μg/ml兩組效果明顯；LPS刺激48h后再加入黃酮，過(guò)24h后取上清測(cè)NO，6個(gè)黃酮刺激組200μg/ml黃酮時(shí)效果最明顯，而且均強(qiáng)于LPS與黃酮同時(shí)加入的組。推斷在對(duì)LPS刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO的影響效果上，蘆筍黃酮提取物清除培養(yǎng)液中NO自由基的效果要明顯強(qiáng)于其對(duì)iNOS免受激活的保護(hù)上。 以D-半乳糖衰老小鼠為研究對(duì)象，觀察蘆筍黃酮對(duì)D-半乳糖衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響，對(duì)其腦組織中脂褐素、超

5、氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、單胺氧化酶(MAO)、乙酰膽堿酯酶(TchE)的影響。以4周齡雄性昆明種小鼠，給以400mg/kg腹腔注射，每天一次，持續(xù)8周。同時(shí)給于低劑量50mg/kg、中劑量100mg/kg、高劑量500m/kg黃酮溶液飲用，與建立模型一樣，共飲用8周。實(shí)驗(yàn)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果顯示，8周后模型組小鼠毛色灰暗稀疏，行動(dòng)遲緩，在新環(huán)境中理毛次數(shù)和站立次數(shù)要明顯少于治療組。記憶能力檢測(cè)顯示，Y水迷宮避暗實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，中