TNF-α與牙周病和慢性肺感染的相關(guān)性實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 建立牙周病、慢性肺感染及兩者相互疊加的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，應(yīng)用免疫組化的方法觀察腫瘤壞死因子-α(TNF-α)在牙周組織及肺組織中的表達(dá)及變化，從細(xì)胞因子的角度探討牙周病和慢性肺感染的相互關(guān)系。 方法： 30只12周齡昆明小鼠隨機(jī)分為兩組(A組和B組)，每組15只，隨機(jī)選取其中一組(A組)通過石膏粉鼓吹法7周建立小鼠慢性肺感染動(dòng)物模型，另一組(B組)同期正常飼養(yǎng)7周為肺部正常組。肺感染模型建立后，將A組小鼠隨機(jī)

2、分為3個(gè)亞組，通過鋼絲結(jié)扎+高糖飲食，在原有肺感染的基礎(chǔ)上疊加建立牙周病模型，依輕重程度分為A1組(慢性肺感與染+牙周正常組)、A2組(慢性肺感染+輕度牙周病組)、A3組(慢性肺感染十重度牙周病組)。另B組同期飼養(yǎng)小鼠也分為三個(gè)亞組，通過相同方法建立牙周病模型，三個(gè)亞組為B1組(空白對(duì)照組)、B2組(輕度牙周病組)、B3組(重度牙周病組)。A、B組均測量牙周袋深度、牙槽骨吸收總量、肺灌洗液淋巴細(xì)胞百分比計(jì)數(shù)，HE染色對(duì)牙周組織、肺組織進(jìn)

3、行組織學(xué)觀察，免疫組化染色觀察TNF-α在牙周組織及肺組織中的表達(dá)，采用計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)半定量分析TNF-α的陽性表達(dá)。 結(jié)果： 1.小鼠牙周袋深度A3組>A2組>A1組(P<0.05)，B3組>B2組>B1組(P<0.05)；小鼠牙槽骨吸收總量A3組>A2組>A1組(P<0.05)，B3組>B2組>B1組(P<0.05)。A1組與B1組、A2組與B2組、A3組與B3組在小鼠牙周袋深度和牙槽骨吸收總量均無明顯差別(P>

4、0.05)。 2.小鼠肺灌洗液淋巴細(xì)胞百分比計(jì)數(shù)：A3組>A2組>A1組(P<0.05)；B3組>B2組>B1組(P<0.05)。 3.牙周組織的病理切片顯示：A1、B1組牙周膜纖維連接牙骨質(zhì)和牙槽骨，牙骨質(zhì)和牙槽骨完整；A2、A3、B2、B3組牙周膜纖維于牙骨質(zhì)和牙槽骨間，牙周膜中可見血管擴(kuò)張充血，骨表面出現(xiàn)蠶食狀骨吸收陷窩，破骨細(xì)胞位于骨吸收陷窩內(nèi)，且A3、B3組的牙周組織破壞較A2、B2更嚴(yán)重。 4.肺組織

5、的病理切片顯示：A組的肺組織肺泡結(jié)構(gòu)不完整，肺間質(zhì)增厚，血管擴(kuò)張充血，大量炎細(xì)胞浸潤，且炎癥程度A3組>A2組>A1組。B組的B2和B3組肺組織可見肺泡結(jié)構(gòu)不完整，炎細(xì)胞浸潤，且B3組的炎癥程度重于B2組；B1組肺組織結(jié)構(gòu)正常，可見完整的肺泡管、肺泡囊及肺泡結(jié)構(gòu)，無炎細(xì)胞浸潤。 5.TNF-α主要在小鼠牙周組織的牙周膜成纖維細(xì)胞、破骨細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)。免疫組織化學(xué)半定量分析牙周組織TNF-α表達(dá)：A3組>A2組>A1組(

6、P<0.05)，B3組>B2組>B1組(P<0.05)。 6.TNF-α主要在小鼠肺組織的肺間質(zhì)細(xì)胞、炎性細(xì)胞、支氣管上皮細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)。免疫組織化學(xué)半定量分析肺組織TNF-α表達(dá)：A3組>A2組>A1組(P<0.05)，B3組>B2組>B1組(P<0.05)。 結(jié)論： 1.通過石膏粉鼓吹法7周可以建立昆明小鼠慢性肺感染動(dòng)物模型。通過鋼絲結(jié)扎+高糖飲食3周可以建立昆明小鼠輕度牙周病模型，鋼絲結(jié)扎+高糖飲