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文檔簡介
1、目的:1.觀察5-Fu腹腔注射對SD大鼠小腸結構及腸屏障功能的影響,比較一次性給藥和分次連續(xù)給藥方案對小腸粘膜的損傷作用;2.探討長雙歧桿菌對5-Fu引起的大鼠腸屏障功能損傷的保護作用及機制。方法:SD大鼠72只隨機分為6組,每組12只。對照組(A)、小劑量5-Fu組(B)、小劑量5-Fu聯合雙歧桿菌組(C);對照組(D)、大劑量5-Fu組(E)、大劑量5-Fu聯合雙歧桿菌組(F)。B組、C組每天腹腔注射5-Fu40mg/kg D1-5
2、天,A組注射等比例生理鹽水;C組每天予雙歧桿菌溶解液1ml灌胃(含長雙歧桿菌1×1010cfu/ml)D1-7天,A組、B組等容積生理鹽水灌胃。E組、F組腹腔注射5-Fu500mg/kg D1天,D組注射等容積生理鹽水;F組每天予雙歧桿菌溶解液1ml灌胃(含長雙歧桿菌1×1010cfu/ml)D1-7天,D組、E組等容積生理鹽水灌胃。實驗中觀察動物體重變化并對腹瀉情況進行評分。于實驗第四天和第八天處死每組各6只動物,活體取小腸組織觀察腸
3、粘膜病理學變化,采用免疫組化方法測定小腸粘膜occludin蛋白、sIgA、PCNA表達。結果:1.各實驗組大鼠體重變化實驗過程中對照組A對照組D體重進行性增加,增加量差別無統計學意義。實驗第四天B組、C組、E組、F組體重明顯下降,與對照組有顯著性差異(P<0.05),C組體重下降小于另外三組,差異有統計學意義(P<0.05)。實驗第八天B組、C組、E組、F組大鼠體重進一步下降,F組體重下降明顯少于其他三組,差異有統計學意義(P<0.0
4、5)。2.各實驗組大鼠腹瀉情況實驗第4天,E組腹瀉程度最嚴重,C組好于B組,F組好于E組,B組好于E組,差異有統計學意義,P,0.01;F組C組之間無差別。實驗第8天,B組腹瀉程度最嚴重,C組好于B組,F組好于E組,E組好于B組,F組好于C組,差異有統計學意義,P,0.01。3.各實驗組大鼠病理評分實驗第4天,E組病理評分最差,C組好于B組,F組好于E組,B組好于E組,差異有統計學意義,P,0.01;F組C組之間無差別。實驗第8天,B組
5、病理評分最差,C組好于B組,F組好于E組,E組好于B組,F組好于C組,差異有統計學意義,P,0.01。4.各實驗組大鼠PCNA、Occludin蛋白、sIgA表達情況B組、C組實驗第4天occludin蛋白、sIgA表達下降,PCNA表達上升,與對照組相比差異有統計學意義,P<0.05。C組occludin蛋白、sIgA、PCNA表達較B組高,差異有統計學意義,P<0.05。實驗第8天occludin蛋白、sIgA表達進一步下降,PCN
6、A表達下降, C組occludin蛋白、sIgA較B組高,PCNA表達較B組低,差異有統計學意義,P<0.05。E組、F組實驗第4天occludin蛋白、sIgA表達下降,PCNA表達上升,與對照組相比差異有統計學意義,P<0.05。F組occludin蛋白、sIgA、PCNA表達較E組高,差異有統計學意義,P<0.05。實驗第8天occludin蛋白、sIgA表達有所上升,但仍低于對照組,與對照組相比差異有統計學意義,P<0.05。P
7、CNA表達下降但仍高于對照組,E組與對照組相比差異有統計學意義,P<0.05。F組occludin蛋白、sIgA較E組高,PCNA表達較E組低,差異有統計學意義,P<0.05。B組與E組,C組與F組之間,實驗第4天occludin蛋白、sIgA、PCNA表達差異無統計學意義,實驗第8天E組、F組occludin蛋白、sIgA、PCNA表達均高于B組、C組,差異有統計學意義,P<0.05。結論:1.腹腔注射5-Fu能成功建立大鼠小腸黏膜損
8、傷-修復模型,大鼠表現出腹瀉次數和腹瀉量的增加及相應的體重下降,小腸形態(tài)學改變表現為絨毛壞死,隱窩消失,腸屏障功能改變表現為機械屏障功能受損(腸黏膜Occludin蛋白表達減少)、腸免疫屏障受損(腸黏膜sIgA含量下降),同時腸上皮再生修復能力下降(PCNA含量下降)。5-Fu500mg/kg一次性腹腔注射大鼠在停藥1周后腸粘膜損傷可以逐步修復。大鼠5-Fu腹腔注射連續(xù)五天的給藥方式較一次性給藥方式所造成的腸粘膜損傷更為嚴重。2.長雙歧
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