ts與5-fu治療的關系

1、國外學者發(fā)現(xiàn)胸苷酸合成酶(TS)是5FU產生耐藥的一個重要酶，癌組織中TS的表達水平可以用于指導治療并與患者的預后相關，TS高表達患者對5FU的敏感性明顯高于低表達者，TS低表達容易對5FU產生耐藥性。胸苷磷酸化酶(Thyinephosphylase，TP)、胸苷酸合成酶(Thyylatesynthase，TS)和二氫嘧啶脫氫酶(dihyyriinedehydrogenase，DPD)是細胞核酸代謝過程中起重要作用的三個酶，并且以不同的

2、角度與5FU相互作用而影響5FU的療效。TP可逆性地催化胸腺嘧啶核苷轉變?yōu)?脫氧核糖1磷酸和胸腺嘧啶，即通過催化胸苷和胸腺嘧啶的相互轉化而穩(wěn)定細胞內胸苷的水平。進入體內的5FU需經(jīng)過TP的作用被活化后才具有抗癌作用，TP還具有血管生成活性，與PDECGF是同一基因的轉錄產物。TS是合成胸苷酸的限速酶，催化dUMP轉化為dTMP，而dTMP是DNA合成和修復所必須的胸腺嘧啶核苷酸的唯一來源，所以TS在細胞增生過程中發(fā)揮重要作用。TS也被證

3、明是5FU作用的靶向酶，5FU就是通過抑制TS活性阻斷DNA合成而發(fā)揮抗腫瘤的作用。DPD是尿嘧啶和胸腺嘧啶分解過程中的第一限速酶，可降低用于DNA合成的尿嘧啶和胸腺嘧啶的水平而影響DNA的合成。DPD同時也是降解5Fu的最主要的限速酶，體內5一FU用量的85%由此酶降解。...胸苷酸合成酶對結腸癌胸苷酸合成酶對結腸癌5－Fu化療耐藥影響的前瞻性研究化療耐藥影響的前瞻性研究【摘要摘要】目的探討結腸癌對5Fu產生耐藥的機理從細胞培養(yǎng)水平

4、上進一步論證胸苷酸合成酶對5Fu化療產生耐藥的影響。方法應用MTT法對體外培養(yǎng)的30例結腸癌細胞進行5Fu藥敏試驗，再應用SP免疫組化法對30例結腸癌進行胸苷酸合成酶檢測，然后將兩個結果進行比較。結果胸苷酸合成酶高表達組體外培養(yǎng)的結腸癌細胞對5Fu的敏感性明顯低于TS低表達組。結論胸苷酸合成酶表達程度的高低對臨床結腸癌患者化療藥物的選擇有一定的指導意義?！娟P鍵詞關鍵詞】結腸癌MTT免疫組織化學胸苷酸合成酶（TS）5Fu細胞培養(yǎng)T

5、heInfluenceofThyylateSynthase(TS)inColonCarcinomaused5FuCureProspectiveStudyCHENXinLINWenboSHENYouzhuDepartmentofPathologyFujianProvincialHospitalFuzhou350001ChinaNananHospitalofFujianProvince；1stHospitalofZhaoancityA

6、bstract：ObjectiveToinvestigatethereasonofthe5FudrugresistancetoprovedeeplytheinfluenceofTSincoloncarcinomawiththelevelofcellculture.MethodsToproceedthe5FudrugsusceptibilitytestwithMTTmethodto30casesinvitroculturecolonc

7、arcinomacelltobeexaminedbySPimmunohistochemicalstainingobservedtheexpressionofTSthencomparewiththem.ResultsInvitroculturecoloncarcinomacellscrespondinghighexpressionofTSthesenilityto5Fudelayobviouslythanthelowexpress

8、ion.ConclusionThepositiveexpressionofTShasainstructionsignificanceincoloncarcinomapatientsattheelectionofchemistrydrug.洗35min；加SP溶液，10min，PBS洗35min；DAB顯色，蘇木素復藍，中性樹膠封片。1.3.3結果判斷TS蛋白表達陽性區(qū)域在細胞漿中出現(xiàn)棕黃色的陽性顆粒。隨機選取4個中倍視野（1010），計

9、算400個細胞漿中陽性細胞的百分數(shù)，當陽性細胞數(shù)目75％為（）。計算每例結腸癌細胞體外培養(yǎng)的5Fu藥敏試驗的抑制率（％）：抑制率（％）=（1試驗孔OD540／對照孔OD540）100％2結果結果30例結腸癌組織TS蛋白表達均為陽性，根據(jù)腫瘤細胞陽性數(shù)分為兩組：高表達組（～），低表達組（～），見表1。表1TS蛋白高表達組與低表達組比較（略）表2TS表達與體外培養(yǎng)的癌細胞5Fu抑制率的關系（略）從表2可以看出TS高表達組的體外培養(yǎng)癌細胞

10、5Fu抑制率明顯低于低表達組，差別具有統(tǒng)計上的意義（P0.05）。3討論討論5Fu廣泛應用于腸道惡性腫瘤的化學治療，由于它療效確切，一直處于其他化療藥無法替代的地位，但一些結腸癌病例對5Fu為主的化療并不敏感，其對5Fu單藥治療的有效率僅20％［3］，本文想通過體外細胞培養(yǎng)，從活細胞水平上論證胸苷酸合成酶對結腸癌5Fu化療耐藥的影響。MTT法的原理是以黃色的四氮唑鹽可被活細胞線粒體中的與輔酶NADP相關的脫氫酶過厚，即接受氫原

11、子而成為不溶性的甲鉺替顆粒，而死細胞無此功能，無甲鉺替顆粒形成，因此用酶標儀測定的OD540值越高，說明腫瘤細胞的耐藥性越強，藥物抑制率越低。胸苷酸合成酶（TS）是由兩個相同亞單位組成的Ⅱ聚體蛋白質，每個亞單位的分子量為36Kda，Hi等研究發(fā)現(xiàn)TS基定位于為類第18號染色體上［1］。TS的功能是催化尿嘧啶脫氧核苷（dUMP）甲基化為胸腺嘧啶脫氧核苷（dTMP），這是dTMP從頭合成途經(jīng)中關鍵的步驟，而dTMP又是DNA的生物合成所必需

12、的，因此，通過對TS進行抑制就能達到抑制DNA的生物合成進而抑制細胞生長或增殖的作用。5Fu正是通過對TS進行抑制而發(fā)揮其抗癌活性的。5Fu進入體內后經(jīng)過一系列酶促反應，最后轉變?yōu)槠浠钚源x產物5氟尿嘧啶脫氧核苷（5FudUMP），它在輔因子510亞甲基四氫葉酸存在下，能與TS結合形成等價的三聯(lián)復合物TSFdUMPCH2FH4，影響dUMP與TS的結合，從而抑制了dTMP的合成，使DNA的合成受限，導致細胞生長受到抑制甚至