腹腔置管引流對重癥急性胰腺炎大鼠腸粘膜免疫屏障功能損傷的影響.pdf

1、 目的：觀察腹腔置管引流術(shù)后重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)大鼠血清及腹水IL-6、TNF-ɑ濃度以及腸液sIgA水平、腸組織CD4+T淋巴細(xì)胞浸潤程度的變化規(guī)律,旨在探討腹腔置管引流對SAP大鼠腸粘膜免疫屏障功能損傷的影響及作用機(jī)制。方法：將72只Wistar大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為3組：SAP組(A組)、SAP引流組(B組)、假手術(shù)對照組(C組)。每組24只,各組又分術(shù)后6、12、24h

2、三個(gè)時(shí)相點(diǎn),每時(shí)相點(diǎn)分配8只大鼠。所有大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周,術(shù)前12h及術(shù)后禁食不禁水。三組動(dòng)物模型制備方法如下,A組：參照Aho法,腹腔注射3%戊巴比妥鈉溶液麻醉(0.1 ml/100 g),腹壁正中切口入腹,尋找胰膽管,動(dòng)脈夾夾閉肝門部膽管,仔細(xì)觀察胰膽管的走行方向及其在十二指腸的開口位置,在胰膽管十二指腸開口處對側(cè)腸壁以4號兒科頭皮針穿刺進(jìn)入胰膽管,連接微量輸液泵,以3 ml/h的速度注射5%牛黃膽酸鈉溶液(0.1 ml/100 g

3、),注射完畢后用動(dòng)脈夾夾閉近十二指腸端的胰膽管10分鐘。肉眼見胰腺組織充血、水腫、出血、壞死等改變后,表明大鼠SAP動(dòng)物模型制備成功,關(guān)腹。B組：SAP模型制備成功后,在大鼠胰周部位置入引流管,切口旁戳孔引出,固定好引流管后,分層關(guān)腹在引流管尾端接上引流袋。C組：僅進(jìn)行開腹手術(shù),翻動(dòng)胰腺3-5次后關(guān)腹。所有大鼠均于術(shù)后補(bǔ)液,按40ml/kg體重于背部皮下注射37℃生理鹽水,間隔12h注射一次,共兩次。分別于術(shù)后的第6、12、24h采集血

4、液、腹 水標(biāo)本,凍存以備檢測。于各時(shí)相點(diǎn)獲取血液標(biāo)本后,處死所配屬的大鼠。采集腸液標(biāo)本,凍存以備檢測；取腸組織置于4%中性甲醛緩沖液中固定；取胰腺組織凍存。采用全自動(dòng)生化分析儀檢測血清及腹水淀粉酶活性, ELISA法測定血清及腹水IL-6、TNF-a濃度,胰腺組織冰凍切片HE染色觀察病理變化,ELISA法檢測腸液sIgA水平,腸組織作CD4+T淋巴細(xì)胞免疫組化染色。結(jié)果：分別于術(shù)后6、12、24h,通過各項(xiàng)指標(biāo)的檢測,有以下發(fā)現(xiàn)：①術(shù)后

5、同時(shí)相點(diǎn)A、B兩組大鼠血清及腹水淀粉酶、IL-6、TNF-a水平均顯著高于C組大鼠水平,且術(shù)后同時(shí)相點(diǎn)A、B兩組大鼠胰腺組織水腫及出血壞死程度均較C組大鼠顯著加重。②對腸液sIgA的檢測發(fā)現(xiàn),術(shù)后各時(shí)相點(diǎn)A、B兩組大鼠均顯著低于C組大鼠水平,且A、B兩組大鼠腸組織中CD4+T淋巴細(xì)胞浸潤程度也均顯著低于C組。③術(shù)后同時(shí)相點(diǎn)B組大鼠血清及腹水淀粉酶、IL-6、TNF-a水平均顯著低于A組大鼠水平；B組大鼠胰腺組織水腫及出血壞死程度較A組明