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文檔簡介
1、目的:通過逆行胰膽管注射5%的牛磺膽酸鈉,制作穩(wěn)定高效的大鼠重癥急性胰腺炎肺損傷模型,并在此基礎上探討腹腔置管引流對大鼠重癥急性胰腺炎肺損傷的作用及相關機制。
方法:將32只雄性SPF級SD大鼠隨機分為以下4組,每組各8只:假手術組:麻醉大鼠后開腹,僅翻動胰腺數(shù)次后關腹;重癥急性胰腺炎組(SAP組):通過微量輸液泵,經十二指腸乳頭逆行胰膽管注射5%的?;悄懰徕c,建立大鼠重癥急性胰腺炎肺損傷模型;腹腔置管引流組(APD組):通過
2、前述方法制作大鼠重癥急性胰腺炎肺損傷模型后,在關腹前留置一根特制引流管于大鼠腹腔,用以引流所產生的腹水;胰腺炎相關性腹水組(PAAF組):將重癥急性胰腺炎大鼠產生的腹水注射到正常大鼠腹腔。造模后24h,收集大鼠胰腺、肺組織,血液及腹水標本,通過光鏡觀察胰腺及肺組織的病理學改變并進行病理評分、計算肺組織濕/干重比(W/D),評估胰腺及肺組織損傷情況;分光光度計法檢測肺組織中MDA的表達及MPO的活性;分別檢測血液及腹水中淀粉酶、TNF-α
3、及IL-1β含量;肺組織中TNF-α、IL-1β及NF-κB含量;免疫組織化學及western blotting方法檢測肺組織中HMGB1蛋白表達情況。
結果:造模后24h,假手術組大鼠并無腹水產生,而重癥急性胰腺炎組有大量腹水產生,并且腹水中可檢測到大量淀粉酶及TNF-α、IL-1β。重癥急性胰腺炎組大鼠胰腺組織病理評分,血清淀粉酶及TNF-α、IL-1β含量均較假手術組升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);此外,重癥急性
4、胰腺炎組大鼠肺組織病理評分、W/D、MPO、MDA、TNF-α、IL-1β、NF-κB含量也明顯較假手術組升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);免疫組化及westernblotting也觀察到重癥急性胰腺炎組大鼠肺組織中HMGB1蛋白表達明顯高于假手術組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。而腹腔置管引流組大鼠與重癥急性胰腺炎組大鼠相比,胰腺組織病理評分及血清淀粉酶,TNF-α及IL-1β均有所降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);此
5、外,腹腔置管引流組大鼠肺組織病理評分、W/D、MPO、MDA、TNF-α、IL-1β、NF-κB含量也明顯較重癥急性胰腺炎組降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);免疫組化及western blotting也觀察到腹腔置管引流組大鼠肺組織中HMGB1蛋白表達明顯低于重癥急性胰腺炎組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);但較假手術組相比較,上述指標仍有所升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。與假手術組相比,胰腺炎相關性腹水組大鼠血液、胰腺
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