P16基因、人乳頭瘤病毒與外陰癌變的關(guān)系.pdf

1、P16基因是一個(gè)多腫瘤抑制基因，是第一個(gè)被分離和克隆的抑癌基因。在多種人類腫瘤中，均發(fā)現(xiàn)其缺失和突變。它參與細(xì)胞周期的調(diào)控，可能是細(xì)胞生長(zhǎng)、分化調(diào)控的中心環(huán)節(jié)。人乳頭瘤病毒(HPV)是目前公認(rèn)的病毒癌基因，其表達(dá)的原癌蛋白能導(dǎo)致上皮細(xì)胞永生化，使細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖失控，細(xì)胞凋亡異常。對(duì)乳腺癌、食管癌及口腔鱗癌的研究中發(fā)現(xiàn)，HPV有非常高的陽(yáng)性表達(dá)率。尤其在宮頸癌的研究中，其表達(dá)率高達(dá)99％。外陰惡性腫瘤約占女性全身惡性腫瘤的1％，其發(fā)病率近

2、年來(lái)有上升趨勢(shì)。但其病因目前尚不清楚。本研究采用PCR的方法檢測(cè)外陰正常皮膚、VIN及外陰癌中的P16基因和HPV16 DNA，以探討其間關(guān)系。 材料和方法: 1、材料與試劑：外陰癌標(biāo)本37例，VINⅢ10例，正常外陰皮膚組織10例，均來(lái)自中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦科手術(shù)切除，經(jīng)病理證實(shí)，福爾馬林固定石蠟包埋的組織。二甲苯、無(wú)水乙醇、DNA提取試劑盒和PCR擴(kuò)增引物(購(gòu)自上海生工試劑公司)，Taq酶、DNTP、DEPC處

3、理雙蒸水和瓊脂糖(購(gòu)自大連寶生物試劑公司)。 2、根據(jù)試劑盒說(shuō)明分別提取各標(biāo)本DNA，進(jìn)行P16基因、HPVl6 DNA及β—actin PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物通過(guò)含EB的2％瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。 結(jié)果: 1、P16基因在正常外陰皮膚組織中的檢出率為100％，在VINⅢ中為50％，在外陰鱗癌中為23．08％，在基底細(xì)胞癌和疣狀癌無(wú)檢出。 2、HPV16 DNA在正常外陰皮膚組織中的檢出率為0，在ViNⅢ中為50

4、％，在基底細(xì)胞癌中為80％，疣狀癌中為66.67％，在VSCC中無(wú)檢出。 3、P16基因在I-Ⅲ期VSCC中為31.25％，Ⅲ-Ⅳ期中為12.5％；在高分化VSCC中的檢出率為2596，在中分化VSCC中為28.57％，在低分化VSCC中無(wú)檢出；在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中為31.2596，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中為10％；大于50歲患者中為30％，小于50歲中為18.75％。 4、在hPV16 DNA陽(yáng)性的外陰基底細(xì)胞癌和疣狀癌病例中，P1