FHIT、p16基因表達(dá)異常與HPV16感染在宮頸癌變中的交互效應(yīng).pdf

1、目的：
　　 宮頸癌是嚴(yán)重危害婦女健康的生殖系統(tǒng)惡性腫瘤。目前已明確高危型HPV(HR-HPV)持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的主要原因。抑癌基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島甲基化是導(dǎo)致抑癌基因失活的重要機(jī)制，抑癌基因p16和FHIT與宮頸癌關(guān)系密切，但其在宮頸癌中的表達(dá)不盡一致，且在宮頸癌中的表達(dá)與HPV16感染的關(guān)系尚存爭(zhēng)議。關(guān)于FHIT、p16基因表達(dá)異常與HPV16感染在宮頸癌變中交互效應(yīng)的研究目前報(bào)道甚少且觀點(diǎn)不一。本研究旨在探討FHIT、

2、p16蛋白異常表達(dá)與HPV16感染的關(guān)系以及在宮頸癌變中的交互效應(yīng)。
　　 方法：
　　 選擇2009年9月-2011年3月在山西醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院就診的宮頸鱗狀細(xì)胞癌新發(fā)病人100例，在山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院婦科、太原市婦幼保健院和介休市婦幼保健院婦科就診的宮頸上皮內(nèi)瘤樣變(CIN)患者142例（其中CINⅠ72例，CINⅡ/Ⅲ70例）及宮頸炎癥患者108例為研究對(duì)象。采用結(jié)構(gòu)式問(wèn)卷收集研究對(duì)象的入口學(xué)特征、性行為、衛(wèi)生及

3、生殖因素等資料，采集手術(shù)或活檢宮頸組織標(biāo)本。用多重PCR法檢測(cè)HPV16感染狀況，甲基化特異性PCR(MSP)法檢測(cè)FHIT、p16基因CpG島甲基化狀態(tài)，Westemblotting法檢測(cè)FHIT和p16蛋白表達(dá)，實(shí)時(shí)熒光定量PCR(realtimePCR)法檢測(cè)HPV16E6/E7、FHIT和p16的mRNA水平。使用SPSS13.0軟件對(duì)資料進(jìn)行整理分析，正態(tài)分布資料采用方差分析，方差不齊的采用Welch檢驗(yàn)，分類(lèi)資料采用x2檢驗(yàn)

4、和趨勢(shì)x2檢驗(yàn)，宮頸癌相關(guān)因素采用單因素和多因素Logistic回歸分析，用交互作用的相加模型進(jìn)行交互效應(yīng)分析。
　　 結(jié)果：
　　 (1)HPV16感染率在crNⅠ組(45.8％)、CINⅡ/Ⅲ組(68.6％)和宮頸癌組(73.0％)均高于宮頸炎組(28.7％)(x2=5.452，P=0.020;x2=25.607，P＜0.001;x2=37.788，P＜0.001)，隨宮頸病變程度加重，HPV16感染率逐漸升高(x2

5、趨勢(shì)247.623，P＜0.001)。宮頸癌組HPV16E6mRNA的表達(dá)分別高于宮頸炎組(P＜0.001)和CINⅠ組(P=0.004)；宮頸癌組HPV16E7mRNA的表達(dá)分別高于宮頸炎組（P＜0.001）、CINⅠ組(P＜0.001)和CINⅡ/Ⅲ組(P=0.018)。
　　 (2)FHITCpG島甲基化率在宮頸炎組、crNⅡ組、CINⅡ/Ⅲ組和宮頸癌組分別為3.7％、13.9％、21.4％和38.0％，隨宮頸病變程度加重

6、FHITCpG島甲基化率逐漸升高(x2趨勢(shì)=40.147，P＜0.001)；FHIT蛋白表達(dá)在CINⅠ組(1.184±0.172)，CINⅡ/Ⅲ組(1.133±0.126)和宮頸癌組(1.099±0.148)均低于宮頸炎組(1.255±0.130)(P=0.001，P＜0.001，P＜0.001)。FHITmRNA表達(dá)在宮頸癌組和CINⅡ/Ⅲ組低子宮頸炎組（P＜0.001，P=0.002），宮頸癌組低于CINⅡ/Ⅲ組(P-0.020)。

7、FHITCpG島甲基化、FHIT蛋白低表達(dá)和HPV16感染在不同宮頸病變組均有正相加作用。HPV16E6和FHITmRNA表達(dá)存在負(fù)相關(guān)，r=-0.142(P=0.008)。
　　 (3)p16CpG島甲基化率在宮頸炎組、CINⅠ組、CINⅡ/Ⅲ組和宮頸癌組分別為0.9％、11.1％、18.6％和35.0％，隨宮頸病變程度加重，p16CpG島甲基化率逐漸升高(x2趨勢(shì)=44.976，P＜0.001)。p16蛋白表達(dá)在CINⅠ組(

8、1.231±0.410)，CINⅡ/Ⅲ組(1.967±0.617)和宮頸癌組(2.123±0.524)均高于宮頸炎組(0.780±0.333)（均為P＜0.001）。p16mRNA表達(dá)在宮頸癌組和CINⅡ/Ⅲ組高于宮頸炎組（P＜0.001，P=0.030），宮頸癌組的表達(dá)高于CINⅡ/Ⅲ組和CINⅠ組(P=0.029，P＜0.001)。p16CpG島甲基化、p16蛋白高表達(dá)和HPV16感染在不同宮頸病變組有正相加作用。HPV16E7和p

9、16mRNA表達(dá)存在正相關(guān)，r=0.397，(P＜0.001)。
　　 (4)將單因素分析有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因素，包括宮頸癌變相關(guān)因素和p16CpG島甲基化、p16蛋白、p16mRNA、FHITCpG島甲基化、FHIT蛋白、FHITmRNA、HPV16等進(jìn)行多因素Logistic回歸分析。影響CINⅠ的主要危險(xiǎn)因素有FHITmRNA、蛋白低表達(dá)，p16蛋白高表達(dá)，F(xiàn)HITCpG島高甲基化，洗陰頻率低，性生活后不清洗，產(chǎn)次多，有腫瘤家

10、族史；影響CINⅡ/Ⅲ的主要危險(xiǎn)因素有HPV16感染，F(xiàn)HITmRNA、蛋白低表達(dá)，p16mRNA、蛋白高表達(dá)，F(xiàn)HITCpG島高甲基化，務(wù)農(nóng)，洗陰頻率低，孕次多，有人工流產(chǎn)史、婦科病史和腫瘤家族史；影響宮頸癌的主要危險(xiǎn)因素有HPV16感染，F(xiàn)HITmRNA、蛋白低表達(dá)，p16mRNA、蛋白高表達(dá)，F(xiàn)HITCpG島高甲基化，務(wù)農(nóng)，洗陰洗澡頻率低，孕產(chǎn)次多，有人工流產(chǎn)史、婦科病史和腫瘤家族史。
　　 結(jié)論：
　　 (1)F

11、HIT蛋白低表達(dá)可增加宮頸癌變風(fēng)險(xiǎn)，隨著宮頸病變進(jìn)展，F(xiàn)HIT蛋白高表達(dá)率逐漸降低，F(xiàn)HIT基因CpG島甲基化和HPV16感染均為導(dǎo)致宮頸癌組織中FHIT蛋白表達(dá)降低的因素，F(xiàn)HITCpG島甲基化、FHIT蛋白低表達(dá)和HPV16感染在宮頸癌變中可能具有協(xié)同作用。
　　 (2)隨宮頸病變進(jìn)展，p16CpG島甲基化率逐漸增高，p16蛋白表達(dá)逐漸增高，p16蛋白高表達(dá)與HPV16E7的異常高表達(dá)有關(guān)，p16蛋白高表達(dá)、HPV16感染與

12、p16CpG島甲基化在宮頸癌變中可能具有協(xié)同作用。
　　 (3)宮頸癌中FHIT蛋白低表達(dá)可能與基因CpG島甲基化和HPV16E6的異常高表達(dá)有關(guān)，而p16蛋白在宮頸癌中的高表達(dá)可能與HPV16E7的異常高表達(dá)有關(guān)。
　　 (4)宮頸癌的發(fā)生是多種因素共同作用的結(jié)果。本次研究再次提示HPV16感染與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，HPV16E6、E7癌基因高表達(dá)不僅是宮頸癌的危險(xiǎn)因素，而且與宮頸癌變的進(jìn)展有關(guān)，務(wù)農(nóng)、性衛(wèi)生習(xí)