p16-KI-67、p16-mcm2表達與高危型HPV感染的關系及其在宮頸癌篩查和HPV分流中的應用評估.pdf

1、目的：
　　1.研究p16/Ki-67和p16/mcm2免疫細胞化學雙染在宮頸病變中的表達及其與高危HPV感染的關聯(lián)，并探討其在宮頸癌篩查中的應用價值。
　　2.比較這兩種標志物在宮頸癌篩查中應用于HPV陽性婦女分流的效果。
　　方法：
　　收集2015年至2016年在中國醫(yī)學科學院腫瘤醫(yī)院(CICAMS)進行的2項前瞻性研究的細胞標本，采用之江HPV試劑盒和羅氏cobas4800HPV試劑盒進行HPV DNA檢

2、測，所有標本完成薄層液基細胞學檢查。將篩查陽性者進行陰道鏡檢查和病理活檢。分別采用p16/Ki-67試劑盒和p16/mcm2抗體混合物對留存標本進行免疫細胞化學雙染檢測。利用基線數據分析p16/Ki-67、p16/mcm2表達與高危型HPV感染的關聯(lián)。以病理結果為金標準，評價這兩種標志物在總人群和HPV DNA陽性人群中對宮頸癌前病變的檢出能力。
　　結果：
　　1.p16/Ki-67表達與高危HPV感染關系分析:p16/K

3、i-67在HPV陽性人群的表達高于HPV陰性人群（x2=95.98，P＜0.001），陽性率分別為37.1％(122/329)和8.9％(43/483)。根據HPV感染型別將HPV陽性者細分為HPV16/18型和非HPV16/18型，相應的p16/Ki-67陽性率分別為34.5％(26/51)和51.0％(96/278)。同高危HPV陰性相比，p16/Ki-67在HPV16/18型別表達的風險(OR=10.7，95％CI:5.6-20.

4、1)近2倍于非HPV16/18型別(OR=5.4，95％CI:3.6-8.1)。
　　2.p16/mcm2表達與高危HPV感染關系分析:同HPV陰性組相比，p16/mcm2在HPV陽性人群的表達風險增加(OR=11.5，95％CI:8.2-16.1)。p16/mcm2陽性率在HPV陰性組、其他12種HR-HPV組、HPV16/18組分別為9.8％(53/540)、53.4％(188/352)和63.4％(59/93)。同高危HPV

5、陰性相比，p16/mcm2在HPV16/18型別表達的風險(OR=16.0，95％CI:9.6-26.5)是其他高危型HPV(OR=10.5,95％CI:7.4-15.0)的1.5倍。
　　3.p16/Ki-67對CIN2+和CIN3+的檢出能力:p16/Ki-67陽性率在病理確診的宮頸炎、CIN1、CIN2、CIN3、宮頸鱗癌中分別為28.2％(51/181)、44.1％(15/34)、81.8％(9/11)、93.3％(14/

6、15)、100％(2/2)，經線性趨勢檢驗，其陽性率隨病理診斷級別的升高而增強（x2=38.57，P＜0.001）;p16/Ki-67檢出CIN2+和CIN3+的靈敏度分別為89.3％和94.1％，特異度分別為69.3％和66.8％;液基細胞學檢查在CIN2+和CIN3+的靈敏度分別為60.7％和64.7％，特異度分別為49.3％和49.1％。
　　4.p16/mcm2對CIN2+和CIN3+的檢出能力:p16/mcm2在宮頸炎、

7、CIN1、CIN2、CIN3的陽性率分別為53.3％(106/199)、57.1％(24/42)、77.8％(14/18)、92.0％(23/25)，趨勢性檢驗顯示其陽性率隨病理診斷級別的升高而升高(x2=15.4，P＜0.001);在總人群中，p16/mcm2檢出CIN2+和CIN3+的靈敏度分別為86.1％和92.0％，特異度分別為46.1％和44.4％;在細胞學診斷為NILM人群中，p16/mcm2檢出CIN2+和CIN3+的靈敏

8、度分別為75.0％和100％，特異度分別為46.4％和46.6％;在細胞學診斷為ASC和LSIL人群中，p16/mcm2檢出CIN2+和CIN3+的靈敏度分別為85.7％和87.5％，特異度分別為45.5％和44.1％，轉診率為53.8％。
　　5.p16/Ki-67和p16/mcm2在HPV陽性人群中對CIN2+和CIN3+的檢出能力:在病理正常、CIN1、CIN2、CIN3和SCC中，p16/Ki-67陽性率分別為34.4％(

9、41/119)、46.2％(12/26)、87.5％(7/8)、92.9％(13/14)和100％(2/2);p16/mcm2陽性率分別為56.3％(67/119)、65.4％(17/26)、75.0％(6/8)、92.9％(13/14)和100％(2/2)。兩標志物陽性率均隨病理診斷級別的升高而升高(P＜0.001)。在所有HPV陽性人群中，p16/Ki-67檢測CIN2+和CIN3+的靈敏度為91.7％和93.8％，特異度為63.5

10、％和60.8％，轉診率為36.2％;p16/mcm2檢測CIN2+和CIN3+的靈敏度為87.5％和93.8％，特異度為42.1％和41.2％，轉診率為58.4％。在HPV陽性且細胞學NILM人群中，p16/Ki-67檢測CIN2+和CIN3+的靈敏度為90.9％和100％，特異度為71.7％和69.4％;p16/mcm2檢測CIN2+和CIN3+的靈敏度為81.8％和100％，特異度為46.2％和46.0％。
　　結論：

11、　　1.p16/Ki-67、p16/mcm2表達與高危HPV感染，尤其是HPV16/18型別具有很強的關聯(lián)性，鑒于高危HPV持續(xù)感染與宮頸癌前病變的關系，p16/Ki-67和p16/mcm2檢測可考慮作為宮頸癌篩查的潛在分子標志物。
　　2.p16/Ki-67檢測靈敏度高于細胞學檢查，特異度與之相似，能有效識別宮頸高度病變和指導CIN的分級;p16/Ki-67雙染制片重現性較好，閱片不依賴于細胞形態(tài)學，普通技術人員經短期培訓即可掌

12、握，可考慮作為液基細胞學的替代方法用于宮頸癌篩查。p16/mcm2靈敏度較高，但特異度有限，能在細胞學正常人群中分揀出宮頸癌前病變患者，同時可用作ASC和LSIL人群的分流方法并有效降低陰道鏡轉診率。
　　3.在HPV陽性婦女中，p16/Ki-67靈敏度與p16/mcm2相似，但其特異度更高，并在更大程度上降低陰道鏡轉診率。因此，p16/Ki-67是一種有應用前景的HPV分流標志物，非常適用于中國醫(yī)療資源缺乏，細胞學篩查體系不健全