乳清酸誘導(dǎo)大鼠糖、脂代謝異常的機(jī)理以及海參皂苷與結(jié)構(gòu)修飾物對(duì)其的影響研究.pdf

1、近二十年，隨著非酒精性脂肪肝(NAFLD)的發(fā)病率日益增高，其發(fā)病機(jī)理、預(yù)防與治療成為當(dāng)今肝病領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。NAFLD在代謝綜合征人群中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)較非代謝綜合征人群高約4.7倍，胰島素抵抗(IR)是代謝綜合征的核心病理基礎(chǔ)。雖然NAFLD與胰島素抵抗之間存在密切的聯(lián)系，但是由于代謝綜合征患者通常存在肥胖、高血脂等直接影響胰島素敏感性的因素，因此，NAFLD與IR兩者之間的直接關(guān)聯(lián)以及因果關(guān)系尚不明確。本論文選用了一個(gè)不伴隨肥胖和高脂血癥

2、的脂肪肝模型—乳清酸誘導(dǎo)大鼠脂肪肝模型，在排除了肥胖和高血脂等干擾因素存在的條件下，研究了脂肪肝形成的長(zhǎng)期過(guò)程中IR和NAFLD之間的直接關(guān)聯(lián)。另外，海參皂苷屬于三萜皂苷，是海參中主要的生理活性物質(zhì)之一，已被證實(shí)其短期喂食對(duì)NAFLD具有顯著的預(yù)防效果。但是，皂苷類物質(zhì)的溶血活性和毒性，限制了其開發(fā)與利用。前期實(shí)驗(yàn)表明，海參皂苷通過(guò)酸解進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，可顯著降低其溶血活性和毒性。本論文在研究了乳清酸誘導(dǎo)大鼠脂肪肝形成過(guò)程中脂肪肝與胰島素抵

3、抗之間的先后關(guān)系后，利用該脂肪肝模型研究并比較了海參皂苷及其結(jié)構(gòu)修飾物、海星皂苷對(duì)乳清酸誘導(dǎo)大鼠脂肪肝發(fā)展過(guò)程中脂代謝和糖代謝的影響，為海參皂苷的開發(fā)利用提供了理論依據(jù)。
　　首先，通過(guò)添加1％乳清酸到大鼠飼料中誘導(dǎo)產(chǎn)生NAFLD模型，研究在OA引發(fā)大鼠NAFLD發(fā)展過(guò)程中IR與NAFLD的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著飼養(yǎng)時(shí)間的推移，肝臟脂質(zhì)蓄積加劇，在誘導(dǎo)大鼠脂肪肝后期，出現(xiàn)了葡萄糖不耐受現(xiàn)象。機(jī)理研究表明，在NAFLD發(fā)病后期，OA可

4、通過(guò)上調(diào)肝臟SREBP-1c及其靶基因的表達(dá)持續(xù)促進(jìn)肝臟脂肪合成；通過(guò)抑制肝臟胰島素信號(hào)通路關(guān)鍵分子基因和蛋白的表達(dá)，特別是t-Akt、p-Akt(ser473)的蛋白表達(dá)，使胰島素信號(hào)傳遞受阻；通過(guò)抑制肝臟糖異生關(guān)鍵限速酶基因的表達(dá)，抑制糖異生；通過(guò)上調(diào)GLUT2的蛋白表達(dá)，增加對(duì)葡萄糖攝取轉(zhuǎn)運(yùn)能力，使糖原在肝臟沉積，導(dǎo)致肝臟糖代謝異常。在該模型中，IR發(fā)生在NAFLD之后，提示非酒精性脂肪肝的長(zhǎng)期存在可能直接導(dǎo)致胰島素的抵抗性。

5、r>　　其次，本研究以海參皂苷為原料，經(jīng)過(guò)弱酸和強(qiáng)酸降解，分別制備了脫硫海參皂苷和海參皂苷苷元兩種毒性較弱的海參皂苷結(jié)構(gòu)修飾物。通過(guò)向乳清酸誘導(dǎo)脂肪肝大鼠飼料中同時(shí)添加0.03%海參皂苷及其脫硫化合物、苷元化合物，研究了海參皂苷及其經(jīng)酸解的結(jié)構(gòu)修飾物對(duì)NAFLD的預(yù)防效果。結(jié)果顯示，海參皂苷經(jīng)酸解修飾后得到的脫硫皂苷、皂苷苷元均能顯著抑制大鼠肝臟TG、TC含量的增加，預(yù)防效果與天然存在的海參皂苷之間無(wú)顯著差異。
　　最后，又進(jìn)一步

6、通過(guò)喂食1%OA飼料6w誘導(dǎo)大鼠脂肪肝后，再添加0.04%海參皂苷及其結(jié)構(gòu)修飾物、海星皂苷到含1%OA的飼料中喂食大鼠8w，研究對(duì)NAFLD的治療效果。一方面，長(zhǎng)期海參皂苷及其修飾物脫硫皂苷、苷元與海星皂苷都能顯著抑制OA誘導(dǎo)的肝臟TG、TC的過(guò)度蓄積，海參皂苷苷元對(duì)脂肪肝的治療效果最佳。另外一方面，海參皂苷和海星皂苷的長(zhǎng)期攝食均可刺激胰島素分泌，顯著改善OA誘導(dǎo)的脂肪肝大鼠葡萄糖不耐受現(xiàn)象。
　　本論文首次研究了乳清酸誘導(dǎo)大鼠脂