BRAF V600E基因突變與甲狀腺乳頭狀癌關(guān)系的臨床研究.pdf

1、目的：探討B(tài)RAFV600E基因突變與甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)相關(guān)臨床病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系，通過對BRAFV600E的檢測，進一步提高對PTC的臨床診斷水平，指導(dǎo)PTC的手術(shù)切除范圍、判斷患者的預(yù)后效果、指導(dǎo)術(shù)后后繼治療及開展以BRAF基因為靶點的分子生物學(xué)治療積累相關(guān)的研究資料。
　　方法：收集蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院2009年1月～2011年8月間經(jīng)手術(shù)切除的60例甲狀腺乳頭

2、狀癌,20例甲狀腺良性病變（甲狀腺腺瘤，結(jié)節(jié)性甲狀腺腫）。采用基因組DNA提取試劑盒提取手術(shù)標(biāo)本的DNA，PCR擴增BRAF基因15外顯子，通過對PCR產(chǎn)物進行DNA序列雙向測序。采用統(tǒng)計軟件SPSS17.0分析PTC與甲狀腺良性病變組織中BRAFV600E基因突變率的差異，并對PTC的各臨床病理學(xué)因素中BRAFV600E基因突變情況進行分析。統(tǒng)計方法用χ2檢驗,檢驗標(biāo)準(zhǔn)為0.05。
　　結(jié)果：1. BRAFV600E基因突變在

3、PTC組織中突變率為65％（39/60），而在甲狀腺良性病變組織中突變率為0%（0/20）。PTC組織中BRAFV600E突變率明顯高于甲狀腺良性病變組織，經(jīng)χ2檢驗兩組間有顯著性差異（χ2=25.366,P＜0.001）。經(jīng) DNA正反雙向測序證實為錯義突變，即第15外顯子的單個堿基錯義突（T1799A）。2.BRAFV600E基因 T-1799-A突變率在患者性別組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=0.011， P＞0.05）；在年齡組間（

4、≥45歲或＜45歲）差異具有顯著性意義（χ2=4.667，P＜0.05）；在腫瘤大小組間（≥2cm或差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=2.336，P＞0.05)；在病理學(xué)亞型組間(經(jīng)典型、濾泡亞型、高細(xì)胞型）,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=6.213，P＜0.05)；臨近組織受侵犯組中BRAFV600E基因突變率明顯高于未受侵犯組，兩組間差異具有顯著性意義(χ2=6.275，P＜0.05）；在有無頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組間，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=6.429，

5、P＜0.05）；在臨床分期組間（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ～Ⅳ期各為一組），兩組間BRAFV600E基因突變率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=10.066，P＜0.05）。
　　結(jié)論：1、BRAFV600E基因突變在PTC患者中檢出率高，而未見于甲狀腺良性病變，提示BRAFV600E基因突變可作為鑒別PTC與甲狀腺良性病變的分子生物學(xué)指標(biāo)。2、BRAFV600E基因突變與 PTC臨床病理學(xué)特征有著密切聯(lián)系，可能作為一種新的標(biāo)準(zhǔn)來衡量PTC患者的危險程度。