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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
預(yù)輸注5-Fu處理的同種異基因淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)大鼠肝移植免疫耐受的初步研究。
方法:
1.雙袖套法建立Wistar-SD的原位肝移植急性免疫排斥模型。
2.體外用不同濃度的5-Fu處理同種異基因淋巴細(xì)胞。
3.實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分4組,每組Wistar供鼠、SD受鼠各10只:A組:對(duì)照組,供、受體鼠無(wú)特殊處理,行肝移植手術(shù)。B組:?jiǎn)渭兞馨图?xì)胞組,受體SD大鼠術(shù)前第7、4
2、天尾靜脈注射淋巴細(xì)胞懸液(5X 106/ml)1ml,共2次。C組:低濃度5-FU+淋巴細(xì)胞組,受體SD大鼠術(shù)前第7、4天尾靜脈注射5-Fu(濃度7.5ug/ml)處理過(guò)的淋巴細(xì)胞懸液(5X 106/ml)1ml,共2次。D組:高濃度5-FU+淋巴細(xì)胞組,受體SD大鼠術(shù)前第7、4天尾靜脈注射5-Fu (濃度15ug/ml)淋巴細(xì)胞懸液(5X 106/ml)1ml,共2次。
4.觀察移植鼠的術(shù)后一般情況,術(shù)后第7天每組大鼠隨
3、機(jī)取處死4只觀察肝臟病理變化,其余的大鼠作生存分析。
5.免疫組織化學(xué)的方法測(cè)定移植術(shù)后肝的FasL、CD4、CD8等分子表達(dá),用image-pro plus6.0軟件進(jìn)行圖像分析。
結(jié)果:
1.肝移植大鼠的存活情況:A組生存時(shí)間為6.7±1.5d,B組生存時(shí)間為10.3±2.7d,C組生存時(shí)間為19.0±5.3d,D組生存時(shí)間為11.7±3.9d。其中B、C、D組和A組差異顯著(P<0.01)
4、,C組和B、D組差異顯著(P<0.01),B、D組差異不顯著(P>0.05)。
2.病理情況:C組大鼠肝臟病理改變呈急性輕度排斥反應(yīng),肝細(xì)胞條索狀排列基本整齊,肝小葉結(jié)構(gòu)存在;中央靜脈血管少量炎性細(xì)胞侵潤(rùn);匯管區(qū)少量淋巴細(xì)胞侵潤(rùn)。A組呈急性重度排斥反應(yīng);B、D組呈急性中度排斥反應(yīng)。C組優(yōu)于A、B、D組。
3.免疫組化CD4、CD8表達(dá):肝小葉中,A組CD8+T細(xì)胞的總累積光密度值(IOD SUM)高于B組、C
5、組和D組(P<0.05)。B組、C組和D組無(wú)差異(P>0.05)。匯管區(qū),A組CD8+T細(xì)胞的IOD SUM高于B組、C組和D組(P<0.05)。C組低于B組和D組(P<0.05)。B組和D組無(wú)差異(P>0.05)。CD4在肝小葉和匯管區(qū)均無(wú)表達(dá)。
4.免疫組化FasL表達(dá):肝小葉中,C組FasL細(xì)胞的IOD SUM高于A組、B組和D組(P<0.05)。B與D組無(wú)顯著性差異(P>0.05)。A組低于B、C、D組(P<0.0
6、5)。匯管區(qū),A組FasL細(xì)胞的IOD SUM低于B、C、D組(P<0.05)。C組高于A、B、D組(P<0.05)。B與D組無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
結(jié)論:
1.成功建立了Wistar-SD大鼠原位肝移植模型。
2.大鼠肝移植急性排斥中,CD8+T細(xì)胞是主要參與者,CD4+T細(xì)胞為輔助者。
3.預(yù)輸注低濃度5-Fu處理的同種異基因淋巴細(xì)胞可以誘導(dǎo)移植肝FasL表達(dá)上調(diào)。
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