胎兒與成人主要器官miRNAs的表達量分析.pdf

1、micro RNA（miRN A)是生物體內(nèi)一類長約21-25個核苷酸的非蛋白編碼的單鏈小分子RNA。它以堿基互補配對的方式結(jié)合到靶mRNA的3’非翻譯區(qū)f3'UTR，通過剪切、降解靶mRNA或是抑制靶mRNA的翻譯，在基因轉(zhuǎn)錄后水平上微調(diào)基因的表達。大量的研究證明，miRNA在細胞的分化、增殖與凋亡，生物體的生長發(fā)育，腫瘤的形成以及多種疾病的發(fā)生等多種過程中起著極其重要的基因表達調(diào)控作用。
　　 研究表明，miRNA的表達具有

2、組織特異性和表達時序性。我們通過檢測和分析我們收集到的一例成人與一例胎兒各七種組織（肝臟組織、肺組織、大腸組織、脾臟組織、腎臟組織、大腦組織、心臟組織）中，miRNA在二者各相應(yīng)組織中表達含量的異同，來探究其在生物體生長發(fā)育過程中的變化趨勢并推測相關(guān)miRNA的生物學(xué)功能。
　　 我們將以上十四個組織分別依次采?。盒》肿覴NA的提取，加多聚A尾，用苯酚一氯仿法抽提多聚A尾的小RNA，逆轉(zhuǎn)錄，在特定PCR體系下進行逆轉(zhuǎn)錄PCR以及

3、實時熒光定量PCR等實驗方法來檢測miRNA的表達含量。
　　 經(jīng)過相關(guān)的統(tǒng)計學(xué)分析，我們發(fā)現(xiàn)胎兒樣本各組織中總miRNAs的表達量比相對應(yīng)的成人樣本中總miRNAs的表達量高。與此同時，在胎兒及成人相對應(yīng)的組織中表達量排名前十的m缺NA的種類也不盡相同。而胎兒樣本跟成人樣本在相同組織中同種miRNA的表達量上也有很大的不同。
　　 通過對miRNAs靶基因的預(yù)測分析，我們發(fā)現(xiàn)miRNAs的表達是具有協(xié)同性的，很多miR