跳舞蜂腦部生物胺、miRNAs、基因表達譜檢測分析.pdf

1、作為一種重要的社會性昆蟲，蜜蜂具有非常復雜的社會行為。對蜜蜂復雜行為中舞蹈語言的研究不僅是研究蜜蜂復雜行為神經(jīng)和分子機制的重要切入口，而且對蜜蜂采集性能的選育提高具有非常重要的意義.本研究從神經(jīng)遞質(zhì)（生物胺）、microRNA和表達譜三個水平比較了采集蜂和跳舞蜂腦部和頭部小分子的差異，以期尋找與采集和舞蹈行為相關的小分子。
　　 利用高效液相色譜法檢測蜜蜂不同跳舞狀態(tài)下腦部生物胺的種類和含量，在不同跳舞狀態(tài)和不同采集距離回巢跳舞

2、的蜜蜂腦部均檢測到較高濃度的去甲腎上腺素（NE）、多巴克(DOPAC)和多巴胺(DA)，且這三種生物胺在不同跳舞狀態(tài)下濃度變化不顯著。同時發(fā)現(xiàn)，跳舞蜂腦部的NE濃度高于DA的濃度，DA的濃度高于DOPAC的濃度.
　　 采用新一代高通量測序技術(Solexa)構建采集蜂和跳舞蜂兩個小RNA庫。通過序列測定與分析，在采集蜂和跳舞蜂中發(fā)現(xiàn)54條已知的miRNAs，其中32條miRNAs在跳舞蜂中顯著下調(diào).ame-miR-278,am

3、e-miR-210，ame-miR-282和ame-miR-34的fold-change絕對值大于2，對這4條miRNAs進行驗證，證實ame-miR-278和ame-miR-282在跳舞蜂中確實顯著下調(diào)，而兩者對應的靶基因多與激酶、神經(jīng)功能、突觸結合蛋白和能量代謝等有關。
　　 利用新一代高通量測序技術(Solexa)測定采集蜂和跳舞蜂的兩個數(shù)字基因表達譜，分別獲得4，286，250和3，453，088條高質(zhì)量序列，分別為原始

4、序列的92.51％和93.03％。測序飽和度和實驗重復性分析結果顯示測序結果穩(wěn)定可靠.通過比較分析篩選出1，898條具有顯著差異的基因，其中506條在采集蜂中顯著上調(diào)，1，392條在跳舞蜂中顯著上調(diào)。采集蜂中顯著上調(diào)的基因中有6條編碼嗅覺相關蛋白，而跳舞蜂中顯著上調(diào)的基因中有10條與神經(jīng)功能相關.
　　 綜合分析生物胺、microRNA和mRNA的檢測結果，在三部分中均發(fā)現(xiàn)參與酪氨酸代謝途徑的分子，推測酪氨酸代謝途徑參與蜜蜂的采