當歸補血湯對急性缺血再灌注大鼠視網(wǎng)膜中腦紅蛋白的影響.pdf

1、腦紅蛋白(neuroglobin，NGB)是一種主要位于腦內神經(jīng)元的攜氧球蛋白，在氧的攝取、運輸和利用等過程中起著極其重要的作用，可作為一種內源性神經(jīng)保護因子保護神經(jīng)元免受缺血性損害。視網(wǎng)膜是人體中耗氧量最高的組織之一，近年來腦紅蛋白與眼缺血性疾病之間的關系越來越受到醫(yī)學工作者的重視。 本課題立足于NGB在視網(wǎng)膜中的高表達與視網(wǎng)膜缺氧之間一定存在著密切的特殊關系這個假說，參照當歸補血湯對缺血缺氧病變的治療作用，以視網(wǎng)膜內NGBm

2、RNA的表達作為研究核心，建立視網(wǎng)膜缺血缺氧的動物模型，目的首先是證實病理狀況下NGB在視網(wǎng)膜中的表達變化，進一步說明NGB與視網(wǎng)膜缺血缺氧之間的關系，并在此基礎上探討當歸補血湯對視網(wǎng)膜缺血缺氧可能的防治作用。 目的：1.建立大鼠急性視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的模型，證實病理狀況下腦紅蛋白mRNA在視網(wǎng)膜中的表達變化，探討腦紅蛋白與視網(wǎng)膜缺血缺氧之間的關系。 2.探討當歸補血湯對急性視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的預防作用，進一步探討中

3、藥對視網(wǎng)膜循環(huán)障礙性疾病的預防作用。 材料與方法：本課題使用成年SD大鼠(體重為200g±10g)，麻醉后分離眼外肌充分暴露視神經(jīng)髓鞘，剪開鞘膜分離視神經(jīng)，距視神經(jīng)乳頭約1.5mm處用自制的可調控自閉式微血管鉗不全夾閉中央動靜脈5min，造成急性視網(wǎng)膜缺血缺氧，而后松開血管鉗使視網(wǎng)膜再灌流。全部72只大鼠隨機分成3個大組(模型組、中藥組、西比靈組)，12個小組(每個大組按照造模后取材時間的不同再分成4個小組)，另設空白對照組(正

4、常組)及假手術組，每組6只動物。利用反轉錄-聚合酶鏈反應對大鼠視網(wǎng)膜中腦紅蛋白mRNA表達進行測定。所得數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差(x±s)表示，用SPSS11.5軟件中的單因素方差分析進行數(shù)據(jù)處理。 結果：1.中藥組大鼠體重(306.00g±20.69g)明顯增加，與其他幾組差異有顯著性(P＜0.01)； 2.模型組中0min、5min及15min取材組A值(腦紅蛋白/內參GAPDH相對光吸收度比值)急劇升高(分別為1.43

5、733±0.288874、1.24350±0.258606、1.12233±0.247122)，與正常組(0.50750±0.036594)間差異非常顯著(P＜0.01)，30min取材組(0.57867±0.108286)與正常組間差異無顯著性(P＞0.05)，提示在急性視網(wǎng)膜缺血再灌注早期腦紅蛋白表達急劇升高。 3.中藥組中0min(0.88433±0.191541)、5min(0.78933±0.088065)、15min

6、取材組(0.56217±0.077295)與模型組相應小組間差異非常顯著(P＜0.01)，A值較模型組低，提示中藥當歸補血湯在急性缺血再灌注損傷早期具有保護視網(wǎng)膜的作用；30min取材組(0.52083±0.043009)與相應模型組之間差異無顯著性(P＞0.05)。 4.中藥組中0min、5min取材組與正常組間的差異非常顯著(P＜0.01)，A值較正常組高，15min、30min取材組與正常組間差異無顯著性，提示中藥當歸補血

7、湯促進腦紅蛋白表達恢復。 5.西比靈組與模型組之間差異均無顯著性(P＞0.05)，提示西比靈膠囊對急性視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷腦紅蛋白表達無影響。 6.正常組與假手術組間A值差異無顯著性(P＞0.05)，提示手術創(chuàng)傷對腦紅蛋白表達無影響。 結論：1.采用可調控式微血管鉗夾閉中央動靜脈進行造模是成功的，單純手術創(chuàng)傷對實驗結果無明顯影響。 2.在急性視網(wǎng)膜缺血再灌注早期腦紅蛋白表達急劇升高，提示腦紅蛋白與急性缺血