胃癌組織中Caveolin-1和E-cadherin的表達(dá)特點(diǎn)和兩者間相關(guān)性的判定.pdf

1、本課題在組織病理學(xué)觀察的基礎(chǔ)上，利用多種實(shí)驗(yàn)方法，在蛋白質(zhì)和mRNA水平對(duì)caveolin-1和E-cadherin的表達(dá)情況及二者的位置關(guān)系進(jìn)行同步觀察，并就它們之間的交互影響/作用以及與不同類型胃癌的關(guān)系進(jìn)行細(xì)致的研究。 研究材料與方法：胃癌石蠟和冰凍組織標(biāo)本選自大連醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)教研室(遼寧省高校癌癥基因組學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室)建立的人癌組織庫(kù)。胃癌細(xì)胞系A(chǔ)GS、HGC-27購(gòu)于中國(guó)科學(xué)院上海分院細(xì)胞庫(kù)；MGC803、BGC8

2、23均從北京腫瘤研究所引進(jìn)。采集的胃癌組織按Lauren分型分為腸型和彌漫型兩個(gè)亞型，并以癌旁相對(duì)正常粘膜和癌前病變(萎縮性胃炎和腸上皮化生)作為對(duì)照?；谑灲M織微陣列，結(jié)合組織特定區(qū)域的蛋白定點(diǎn)捕獲，應(yīng)用免疫組織化學(xué)和Western蛋白印跡分析等方法，平行檢測(cè)E-cadherin、caveolin-1在不同類型胃組織中的表達(dá)特點(diǎn)與分布情況。進(jìn)一步應(yīng)用RT-PCR、Western蛋白印記分析及雙標(biāo)記免疫熒光檢測(cè)E-cadherin、c

3、aveolin-1在胃癌細(xì)胞系中的表達(dá)特點(diǎn)。用Kruskal-Wallis檢驗(yàn)方法對(duì)上述指標(biāo)在不同類型胃癌組織的表達(dá)情況進(jìn)行差異分析；用Spearman相關(guān)分析檢測(cè)這兩個(gè)指標(biāo)間的相關(guān)性。 研究結(jié)果： 1.在僅有的3例相對(duì)正常胃粘膜中，細(xì)胞膜上的E-cadherin均為強(qiáng)陽(yáng)性，而細(xì)胞膜上的Caveolin-1均為陰性(由于樣本例數(shù)太少，未列入統(tǒng)計(jì)學(xué)運(yùn)算)。胃癌組織與癌前病變相比，細(xì)胞膜上的E-cadherin表達(dá)明顯減少(

4、P＜0.01)；而且，E-cadherin在彌漫型胃癌中的表達(dá)水平明顯低于在腸型胃癌中的表達(dá)(P＜0.01)。胃癌組織與癌前病變相比，caveolin-1在細(xì)胞膜上的分布無(wú)差異(P＞0.05)；而caveolin-1的表達(dá)在腸型胃癌和彌漫型胃癌之間存在明顯差異(P＜0.01)，即caveolin-1在彌漫型胃癌中的表達(dá)水平明顯低于腸型胃癌。在22例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中，20例(90.9﹪)有caveolin-1細(xì)胞膜表達(dá)，4例(18.2﹪)有

5、E-cadherin細(xì)胞膜表達(dá)。 2.Caveolin-1與E-cadherin相關(guān)性分析的結(jié)果為：在腸型胃癌中，細(xì)胞膜上caveolin-1和E-cadherin的表達(dá)無(wú)相關(guān)性；在腸型胃癌的胞漿中，caveolin-1和E-cadherin的表達(dá)亦無(wú)相關(guān)性。在彌漫型胃癌中，細(xì)胞膜上的caveolin-1和E-cadherin的表達(dá)之間沒(méi)有相關(guān)性，在彌漫型胃癌的胞漿中caveolin-1與E-cadherin的表達(dá)呈正相關(guān)(r=

6、0.642，P＜0.01)。 3.胃癌組織的Western蛋白印跡結(jié)果顯示：與癌前病變相比，彌漫型胃癌與腸型胃癌中E-cadherin的表達(dá)均降低，但E-cadherin在彌漫型胃癌中的表達(dá)更低甚至無(wú)表達(dá)。與癌前病變相比，caveolin-1在腸型胃癌和彌漫型胃癌中的表達(dá)無(wú)明顯變化，即無(wú)增減趨勢(shì)。由于腫瘤的間質(zhì)(血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等)也有caveolin-1的表達(dá)，從而影響了對(duì)caveolin-1真實(shí)表達(dá)情況的判定。

7、 4.雙標(biāo)記免疫熒光染色的結(jié)果示：形態(tài)學(xué)上未看到caveolin-1和E-cadherin在胃癌細(xì)胞膜上或胞漿中有明確的相同的位置關(guān)系，即未看到大量明顯的黃色熒光。從mRNA和蛋白水平觀察AGS、HGC-27、MGC803和BGC823這四個(gè)人胃癌細(xì)胞系，caveolin-1與E-cadherin的mRNA含量及其相應(yīng)的蛋白表達(dá)高低并不一致，即無(wú)規(guī)律性。 研究結(jié)論： 1)與癌前病變相比，細(xì)胞膜E-cadherin在胃癌

8、組織中的表達(dá)降低，而細(xì)胞膜caveolin-1在胃癌中表達(dá)無(wú)明顯變化；但兩者的表達(dá)水平均與胃癌的分化程度密切相關(guān)，即細(xì)胞膜上的caveolin-1與E-cadherin在彌漫型胃癌中的表達(dá)水平明顯低于在腸型胃癌中的表達(dá)。 2)在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中，黏附分子E-cadherin缺失尤為明顯，這很可能有利于腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移；而caveolin-1呈高頻率表達(dá)，這可能有利于腫瘤細(xì)胞在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的生存。但目前還缺乏后者對(duì)前者具有調(diào)節(jié)