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1、該實(shí)驗(yàn)應(yīng)用抑制性消減雜交(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)技術(shù)構(gòu)建了人腎細(xì)胞癌組織與相應(yīng)正常腎上皮組織差異表達(dá)的cDNA消減文庫(kù),并利用斑點(diǎn)印記雜交(Dot Blot)技術(shù)從中篩選出腎細(xì)胞癌差異表達(dá)的基因,隨機(jī)選取部分陽(yáng)性克隆進(jìn)行測(cè)序,結(jié)果在GenBank中做同源性比對(duì)分析.研究結(jié)果表明:應(yīng)用SSH技術(shù)構(gòu)建了具有較高消減效率的人腎細(xì)胞癌組織與相應(yīng)正常腎上皮組織的cDNA消減文庫(kù),文庫(kù)中
2、含有400個(gè)陽(yáng)性克隆,隨機(jī)挑取200個(gè)克隆,進(jìn)行擴(kuò)增,Dotblot篩選出177個(gè)陽(yáng)性克隆,對(duì)其中55個(gè)克隆中的cDNA插入片段進(jìn)行測(cè)序后經(jīng)GenBank檢索表明共含有26種獨(dú)立的基因片段,已知基因片段24種,和未知基因片段2種.該研究通過(guò)構(gòu)建人腎細(xì)胞癌與正常腎上皮差異消減的cDNA文庫(kù),既獲得了一些已知的腫瘤相關(guān)基因片段,驗(yàn)證了前人的研究成果;又獲得了一些新的基因片段為進(jìn)一步研究基因功能打下基礎(chǔ).同時(shí)也為今后腎細(xì)胞癌的特異性診斷、預(yù)后
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