Aβ-,1-40-對原代培養(yǎng)胎鼠皮質神經(jīng)元的神經(jīng)毒性作用及人參二醇保護作用的實驗研究.pdf

1、浙江大學碩士學位論文Aβ對原代培養(yǎng)胎鼠皮質神經(jīng)元的神經(jīng)毒性作用及人參二醇保護作用的實驗研究姓名：鄭麗華申請學位級別：碩士專業(yè)：人體解剖與組織胚胎學指導教師：孫百強20070501浙江大學研究生碩士學位論文結果：1 ．皮質神經(jīng)元經(jīng)3 、6 、1 2 1 ．t m o l ／L 的A 艮粕作用2 4 h 后，神經(jīng)元形態(tài)、存活率和乳酸脫氫酶( L D H ) I 均釋放量均發(fā)生了變化，神經(jīng)元生長狀態(tài)不良；各組細胞M T T 比色實驗所測得的在

2、5 7 0 r i m 處的光吸收值( O D 值) 分別為0 ．6 8 6 士0 ．0 3 6 、0 ．4 4 0 - _ 1 ：0 ．0 5 6 、0 ．1 9 6 士0 ．0 4 0 ；各組細胞培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶( L D H ) 的濃度值分別為( 2 6 5 ．7 d ：2 5 ．I )U ／g p r o t 、( 3 5 1 ．5 ：￡4 2 ．1 ) U ／g p r o t 、( 5 5 7 ．8 士2 5 ．8 ) U

3、 ／g p r o t 。隨著A B l - 4 0 濃度的增加，O D 值減小，L D H 的釋放量增加，與空白對照組相比，這兩項指標在A B l 枷較高劑量組( 6 、1 2 1 a m o l ／L ) 有明顯統(tǒng)計學意義( 均尸< 0 ．0 1 ) ，低劑量組( 3 p m o l ／L ) 也有統(tǒng)計學意義( P < O ．0 5 ) 。2 ．神經(jīng)元經(jīng)終濃度分別為1 0 、2 0 、4 0 m g ／L 的人參二醇預處

4、理2 4 小時后，再加入1 2 p m o F L 的A 6 1 枷處理4 8 d “ 時，測得它們的在5 7 0 r i m 處的O D 值分別為0 ．2 3 9 士0 ．0 2 7 、0 ．4 1 2 士0 ．0 5 2 、O ．6 8 6 - 士0 ．0 2 2 ；L D H 的濃度值分別為( 5 4 9 ．9 士1 7 ．4 ) U ／g ≯r o t 、( 4 4 7 ．7 士2 3 ．6 )U ／g p r o t 、( 2

5、 8 5 ．3 士4 4 ．9 ) U ／g p r o t 。而只加入1 2 肛m o l ／L 的A p l 枷組的神經(jīng)細胞的O D 值和L D H 的濃度值分別為0 ．2 1 5 士0 ．0 1 4 和( 5 6 9 ．9 士1 8 ．6 ) U ／g p r o t 。與只j J l l ．K 1 2 1 ．t m o l ／L 的A 既枷組相比，這兩項指標在人參二醇的較高劑量組( 2 0 、4 0 r a g ／L ) 有明顯

6、統(tǒng)計學意義( 均P < 0 ．0 1 ) ，低劑量組( 1 0 m g ／L ) 也有統(tǒng)計學意義( 尸< 0 ．0 5 ) 。且神經(jīng)元的狀態(tài)也較只加A ．1 2 I _ t m o l ／L 的A B l ．．4 0 組的好，細胞形態(tài)基本完整。討論：1 ．A D 細胞模型的制作自從1 9 9 0 年Y a n k n e r 首先證實合成的A 1 3 對培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元有毒性作用以來，體外培養(yǎng)的細胞模型以其簡便、實用的優(yōu)點

7、被廣泛用來研究A B 的神經(jīng)毒性機制。分析A B 毒性機制的典型指標包括神經(jīng)元形態(tài)觀察、細胞存活增值程度及L D H釋放實驗等。L D H 是細胞內(nèi)標志性酶，其化學和生物性質十分穩(wěn)定。通常情況下L D H 的漏出很少，L D H 的釋放與細胞膜的完整性相關，且釋放量與細胞受損程度里正相關。通過測定培養(yǎng)液中的L D H 的活力變化，可間接反映A 1 3 對神經(jīng)細胞的毒性作用及藥物抗A p 神經(jīng)毒性的能力。我們利用A p l 郴造模的結果提