Aβ-,1-40-誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元死亡方式的研究及NGF的抗凋亡作用.pdf

1、AD是一種以獲得性進(jìn)行性記憶減退、認(rèn)知功能障礙以及行為異常為特征的神經(jīng)退行性疾病.其三大病理特征是:老年斑(SP)、神經(jīng)元纖維纏結(jié)(NFT)和神經(jīng)元數(shù)目的減少.β-淀粉樣蛋白(Aβ)是構(gòu)成SP的核心成分,也是NFT的生化基礎(chǔ)<'[1]>,對神經(jīng)細(xì)胞有直接的毒性作用,但致神經(jīng)細(xì)胞凋亡和壞死的百分比,目前研究的還不十分清楚.NGF作為一種神經(jīng)營養(yǎng)因子,能否抑制AD的神經(jīng)元變性仍存在爭議.目的:研究Aβ對體外培養(yǎng)海馬神經(jīng)細(xì)胞的毒性作用,及NG

2、F對Aβ誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用.方法:1、取新生1天SD大鼠的海馬區(qū),應(yīng)用一般培養(yǎng)法、加阿糖胞苷法、加阿糖胞苷和神經(jīng)生長因子法培養(yǎng)神經(jīng)元,進(jìn)行神經(jīng)元形態(tài)的觀察,用倒置顯微鏡觀察法和MTT比色分析檢測神經(jīng)元存活率,并用ABC免疫組化反應(yīng)法比較三種不同培養(yǎng)方法在不同培養(yǎng)時(shí)間所得神經(jīng)元的純度.2、觀察不同濃度、不同時(shí)間Aβ<,1-40>對體外培養(yǎng)的海馬神經(jīng)細(xì)胞的毒性,并用透射電鏡、瓊脂糖凝膠電泳、熒光染色進(jìn)行細(xì)胞凋亡和壞死的檢測.3