微生物發(fā)酵法酶解蛋白及其對(duì)黃羽肉雞生產(chǎn)性能和腸道菌群的影響.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)利用枯草芽孢桿菌產(chǎn)蛋白酶特性，優(yōu)化最佳產(chǎn)酶條件，并添加外源酶降解蛋白生成小肽。將含有益生菌的復(fù)合小肽作為蛋白源飼喂肉雞，檢測(cè)其生產(chǎn)性能，并用PCR-DGGE技術(shù)檢測(cè)肉雞腸道菌群變化情況。 選取本實(shí)驗(yàn)室分離保存的一株芽孢桿菌，經(jīng)16SrRNA鑒定為枯草芽孢桿菌。用Folin-酚法測(cè)定影響細(xì)菌產(chǎn)蛋白酶的幾種主要因素(溫度、起始pH、時(shí)間、接種量)在不同條件下對(duì)酶活力的影響，根據(jù)單因素條件下的測(cè)定結(jié)果，設(shè)計(jì)四因素三水平正交實(shí)驗(yàn)(

2、L9(34))，確定最佳產(chǎn)酶條件為：溫度30℃，起始pH7.5，發(fā)酵時(shí)間18h，接種量1％。 利用芽孢桿菌和外源酶酶解蛋白，并優(yōu)化外源酶酶解條件(Alcalase添加量、flavourzyme添加量、酶解pH值、酶解時(shí)間)，根據(jù)單因素條件下的測(cè)定結(jié)果，設(shè)計(jì)四因素三水平正交實(shí)驗(yàn)(L9(34))，確定酶解條件為：Alcalase蛋白酶添加量為0.016AU/g，flavourzyme風(fēng)味復(fù)合蛋白酶添加量達(dá)到25LAPU/g，酶解溫度

3、為60℃，酶解時(shí)間為5h。酶解蛋白產(chǎn)物成品每克含小肽67.53％，氨基氮15.47％，水解度27.65％，芽孢桿菌活菌數(shù)1.825×108CFU/g。 將復(fù)合小肽按1.2％、0.8％、0.5％、0.3％添加于日糧中飼喂黃羽肉雞，檢測(cè)對(duì)生產(chǎn)性能影響。結(jié)果表明，試驗(yàn)組二(添加0.8％)與對(duì)照組相比，總增重高出31.04％，差異極顯著(P＜0.01)；料肉比降低了17.29％，差異顯著(P＜0.05)；腹瀉率降低5.95％，差異極顯著

4、(P＜0.01)。試驗(yàn)組一(添加1.2％)總增重效果差異顯著(P＜0.05)；料肉比差異顯著(P＜0.05)；腹瀉率差異極顯著(P＜0.01)。試驗(yàn)組三、四與對(duì)照組相比，總增重和料肉比效果差異均不顯著(P＞0.05)；腹瀉率差異極顯著(P＜0.01)。 采集試驗(yàn)效果最佳一組(添加量0.8％)與對(duì)照組不同試驗(yàn)周糞樣進(jìn)行腸道菌群組成及多樣性分析，結(jié)果表明試驗(yàn)初期腸道菌群數(shù)量較少，并無(wú)規(guī)律性。3周時(shí)腸道菌群相似性升高，多樣性增加。6周