組織工程材料的表面修飾對骨髓基質(zhì)細胞粘附、增殖及定向成骨細胞分化的影響及體內(nèi)成骨效應(yīng).pdf

1、該文以下方面進行探討:(1)采用不同原代細胞分離方法,研究其對MSCs細胞的生物學(xué)特性影響.(2)檢測基因勝肽膠對MSCs細胞粘附、增殖及分化的影響.(3)分別采用I型膠原及纖維粘連蛋白(fibronectin,FN)包被聚乙醇酸-乳酸共聚物(Poly(lactide-co-glycolide),PLGA)膜及多孔塊型PLGA材料,觀察細胞在單層或三維培養(yǎng)狀態(tài)下,I型膠原及FN對MSCs細胞粘附、增殖及向成骨細胞分化效應(yīng)及能力.(4)檢

2、測I型膠原對MSCs細胞骨架肌動蛋白及細胞內(nèi)游離鈣離子的影響,了解I型膠原促進MSCs細胞粘附的內(nèi)在機制.(5)觀察經(jīng)I型膠原包被的多孔塊型PLGA材料體內(nèi)成骨效果,尤其是材料中心部位的成骨情況.為研制具有細胞粘附能力、高效誘骨效應(yīng)的新型活化人工骨提供實驗依據(jù)和新的解決途徑.該研究結(jié)果提示:(1)密度梯度離心法和紅細胞裂解法均可用于分離純化MSCs細胞,對細胞的生物學(xué)特性無明顯影響.(2)利用旋轉(zhuǎn)法制膜、快速成形新工藝制備多孔塊型PLG

3、A材料,前者機器轉(zhuǎn)速恒定,后者在計算機控制下的數(shù)字化成形,保證了材料表面結(jié)構(gòu)、空間構(gòu)型等的較好統(tǒng)一.(3)基因勝肽膠可促進MSCs細胞的早期粘附,但對于細胞晚期粘附、細胞增殖及細胞堿性磷酸酶活性均無明顯促進作用,提示其不具備良好的材料表面修飾劑特性.(4)I型膠原、纖維粘連蛋白均能促進細胞粘附,和細胞培養(yǎng)體系無關(guān),經(jīng)I型膠原、纖維粘連蛋白修飾的材料,細胞分布均勻,鋪展良好,顯示出良好的細胞相容性.(5)I型膠原、纖維粘連蛋白還可同時促進

4、細胞增殖,誘導(dǎo)MSCs細胞向成骨細胞分化,是理想的骨組織工程材料表面修飾蛋白.(6)體內(nèi)實驗進一步證明了I型膠原包被材料后的誘骨能力.(7)對MSCs細胞骨架actin及細胞內(nèi)鈣的檢測,表明I型膠原能促進MSCs細胞骨架蛋白肌動蛋白的組織和表達,同時可增加細胞內(nèi)游離鈣離子濃度.說明細胞粘附和細胞內(nèi)肌動蛋白的構(gòu)建和表達以及細胞內(nèi)游離鈣離子濃度有一定關(guān)聯(lián).綜上所述,骨組織工程高分子材料PLGA經(jīng)I型膠原、纖維粘連蛋白表面修飾后可明顯提高MS