CTGF對小鼠術(shù)后腹膜粘連形成的影響及機(jī)制的實(shí)驗研究.pdf

1、目的:
　　通過檢測小鼠術(shù)后腹膜粘連組織中CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的mRNA及蛋白表達(dá)情況,探討結(jié)締組織生長因子(CTGF)在術(shù)后腹膜粘連形成過程中的作用及其機(jī)制。
　　方法:
　　105只昆明小鼠隨機(jī)分成正常對照組、假手術(shù)組、模型組,每組35只。正常對照組僅麻醉不作其他任何處理;假手術(shù)組小鼠麻醉后,切開進(jìn)入腹腔,直接關(guān)腹;模型組制備成腹膜粘連模型。在術(shù)后分別于7個時間點(diǎn)(第3、6、9、12、15、1

2、8和21天)處死小鼠,每個時間點(diǎn)每組隨機(jī)各處死5只小白鼠,采取隨機(jī)雙盲法,對腹膜粘連程度進(jìn)行評估,并留取標(biāo)本,應(yīng)用HE染色觀察病理變化、Masson,s三色染色觀察膠原沉積、RT-PCR法檢測標(biāo)本組織中CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的mRNA表達(dá)及免疫組織化學(xué)法檢測標(biāo)本組織中CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1、術(shù)后各時間點(diǎn)正常對照組和假手術(shù)組觀察區(qū)均未形成粘連;模型組隨著術(shù)

3、后時間推移,腹膜粘連評分逐漸增高,粘連評分與術(shù)后時間遞增呈顯著正相關(guān)(r=0.718,P<0.05)。
　　2、各組標(biāo)本組織中的膠原沉積:正常對照組與假手術(shù)組膠原沉積面積百分?jǐn)?shù)無顯著差異(P>0.05),模型組膠原沉積面積百分?jǐn)?shù)顯著高于正常對照組、假手術(shù)組(P<0.05),模型組膠原沉積面積百分?jǐn)?shù)與術(shù)后時間遞增呈顯著正相關(guān)(r=0.981,P<0.05)。
　　3、各組標(biāo)本組織中CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的m

4、RNA表達(dá):兩組間比較正常對照組與假手術(shù)組CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的mRNA表達(dá)水平無顯著差異(P>0.05);模型組CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的mRNA表達(dá)水平顯著高于正常對照組和假手術(shù)組(P<0.05);術(shù)后各時間點(diǎn)模型組CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的mRNA表達(dá)水平均顯著高于正常對照組、假手術(shù)組(P<0.05)。模型組CTGF的mRNA表達(dá)水平與腹膜粘連評分呈明顯正相關(guān)(r=0.44

5、4,P<0.05);術(shù)后第3-18天 CTGF的mRNA表達(dá)水平與膠原沉積面積百分?jǐn)?shù)呈顯著正相關(guān)(r=0.654,P<0.05);模型組CollagenⅠ與CTGF的mRNA表達(dá)水平呈顯著的正相關(guān)(r=0.787,P<0.05);術(shù)后第6-21天,模型組TIMP-1與CTGF的mRNA表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)(r=0.665,P<0.05)
　　4、各組標(biāo)本組織中CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的蛋白表達(dá):兩組間比較正常對照

6、組與假手術(shù)組 CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的蛋白表達(dá)水平無顯著差異(P>0.05);模型組CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的蛋白表達(dá)水平顯著高于正常對照組和假手術(shù)組(P<0.05);術(shù)后各時間點(diǎn)模型組CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的蛋白表達(dá)水平均顯著高于正常對照組、假手術(shù)組(P<0.05)。模型組CTGF的蛋白表達(dá)水平與腹膜粘連評分呈顯著正相關(guān)(r=0.617,P<0.05);模型組CTGF的蛋白表達(dá)

7、水平與膠原沉積面積百分?jǐn)?shù)呈顯著正相關(guān)(r=0.530,P<0.05);模型組CollagenⅠ與CTGF的蛋白表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)(r=0.555,P<0.05);模型組TIMP-1與CTGF的蛋白表達(dá)水平有顯著正相關(guān)(r=0.850,P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、小鼠術(shù)后腹膜粘連組織中CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的mRNA及蛋白呈高水平表達(dá);
　　2、CTGF mRNA及蛋白表達(dá)水平隨腹膜粘連評