丁酸鈉抑制卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文丁酸鈉抑制卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究姓名：張麗娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)（腫瘤）指導(dǎo)教師：湯春生20030408中文摘要丁酸鈉抑制卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究博士研究生張麗娟博士生導(dǎo)師湯春生目的：卵巢惡性腫瘤是女性生殖道腫瘤的首位死亡原因，其五年生存率僅為30％40％。因解剖學(xué)位置和生物學(xué)特性的特殊性，80％患者確診時(shí)已存在廣泛轉(zhuǎn)移，多數(shù)死于盆腹腔種植性轉(zhuǎn)移、淋巴道轉(zhuǎn)移及血道轉(zhuǎn)移。故探索卵巢癌轉(zhuǎn)移機(jī)制至關(guān)重要。在腫

2、瘤細(xì)胞從非轉(zhuǎn)移表型向轉(zhuǎn)移表型轉(zhuǎn)變過程中，轉(zhuǎn)移相關(guān)基因如KAll、nm23H1等的表達(dá)變化和功能狀態(tài)是關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。本課題是一項(xiàng)從基礎(chǔ)到臨床、層次遞進(jìn)的系列研究，包括細(xì)胞體外實(shí)驗(yàn)、動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和臨床實(shí)驗(yàn)，旨在通過觀察丁酸鈉對(duì)人卵巢癌細(xì)胞、人卵巢癌細(xì)胞裸鼠移植瘤侵襲轉(zhuǎn)移能力的抑制作用，探討其抑制腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的內(nèi)在機(jī)制，同時(shí)評(píng)估多種轉(zhuǎn)移相關(guān)基因在卵巢癌進(jìn)展中的意義，為丁酸鈉應(yīng)用于卵巢癌化療提供理論依據(jù)和指導(dǎo)作用。方法：課題分為三部分：1丁酸鈉

3、對(duì)人卵巢癌細(xì)胞體外作用及機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究。人卵巢漿液性囊腺癌細(xì)胞株HO8910PM細(xì)胞體外培養(yǎng)。采用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法，測(cè)定不同濃度丁酸鈉作用不同時(shí)間對(duì)人卵巢癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用，計(jì)算出丁酸鈉對(duì)該種細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)：倒置顯微鏡觀察丁酸鈉作用前后細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，電子掃描顯微鏡觀察作用前后細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變：遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)丁酸鈉作用前后細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力的變化；分別采用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RTPCR)技術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)染色