MiR-126調控cofiliN-1與上皮性卵巢癌侵襲轉移關系的研究.pdf

1、研究目的:
　　卵巢癌因其進展迅速，容易腹腔內廣泛轉移，因此在確診時多數(shù)患者已處于晚期，目前已經(jīng)成為婦科致死率最高的腫瘤之一。卵巢癌細胞惡性生物學行為強，大部分患者接受標準化治療后2年左右出現(xiàn)腫瘤復發(fā)及耐藥，因此晚期卵巢癌患者5年生存率較低。近年來研究表明各種miRNA可通過作用于mRNA轉錄后水平在腫瘤發(fā)生發(fā)展中起到抑癌或促癌作用。對于miR-126，有研究表明在乳腺癌、肺癌、前列腺癌等多種腫瘤發(fā)生發(fā)展中起著抑癌基因的作用，但其

2、在卵巢癌中的作用尚不明確。絲切蛋白(Cofilin)是一種肌動蛋白結合蛋白，在細胞骨架重塑和移動調節(jié)上起著重要作用，而卵巢癌等惡性腫瘤細胞的分裂、遷移及特異性結構依賴于細胞骨架的動力學調節(jié)。為此本研究擬通過體外培養(yǎng)SKOV3卵巢癌細胞株并轉染不同miR-126基因片段，比較miR-126與Cofilin-1表達之間的關系，以此研究miR-126是否可通過調控conflin-1而參與卵巢癌細胞的侵襲轉移的調節(jié)。
　　研究方法:

3、>　　本研究將人卵巢漿液性囊腺癌SKOV3細胞株進行體外培養(yǎng)，miR-126通過慢病毒的包裝后轉染人卵巢漿液性囊腺癌SKOV3細胞系，上述卵巢癌細胞分成四組，分別為:miR-126過表達組（SKOV3+LV3-has-miR-126組）、miR-126抑制表達組（SKOV3+LV3-has-miR-126 inhibitor組）、轉染陰性對照組(SKOV3+LV3NC組)和空白對照組（SKOV3組），實驗采用Transwell侵襲實驗觀

4、察各組細胞的侵襲能力，通過免疫熒光法觀察cofilin-1表達水平的差異。
　　研究結果:
　　1.Transwell侵襲實驗的結論表明miR-126過表達組(SKOV3+LV3-has-miR-126組SKOV3細胞侵犯基質膠的穿膜細胞數(shù)明顯少于miR-126抑制表達組（SKOV3+LV3-has-miR-126 inhibitor組）(P＜0.05)，同時也明顯少于轉染陰性對照組（SKOV3+LV3NC組）和空白對照組（

5、SKOV3組）的穿膜細胞數(shù)（P均＜0.05）。
　　2.免疫熒光檢測結果顯示，LV3-has-miR-126組細胞Cofilin-1表達明顯低于miR-126抑制表達組（SKOV3+LV3-has-miR-126 inhibitor組）、轉染陰性對照組（SKOV3+LV3NC組）和空白對照組（SKOV3組），而LV3-has-miR-126 inhibitor組Cofilin-1表達明顯高于轉染陰性對照組（SKOV3+LV3NC組