二氫楊梅素半合成楊梅素工藝研究.pdf

1、楊梅素廣泛存在于自然界植物中，具有多種藥理活性，是多種先導藥物的前體，也可以直接作為藥物。在植物中楊梅素含量較低，提取分離工藝復雜，難度大，造成市場上楊梅素產(chǎn)品供應(yīng)不足，價格高。研究表明顯齒蛇葡萄中二氫楊梅素含量高達30％以上，資源豐富。本文依據(jù)二氫楊梅素與楊梅素結(jié)構(gòu)相似的特點，通過化學轉(zhuǎn)化法半合成楊梅素的工藝研究。主要研究內(nèi)容如下：
　　（1）建立了楊梅素的UV法和HPLC檢測方法；UV法測定楊梅素的檢測波長為375nm，標準曲

2、線方程為 C=14.328A-0.1871，r=0.9998，楊梅素的質(zhì)量濃度在3.52~10.56μg/mL范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系。該方法精密度良好，方法穩(wěn)定，可重復性高。HPLC法檢測條件為：Hypersil BDS C18柱，流動相為乙腈-0.1%磷酸水溶液（24:76），流速為1.0 mL/min，柱溫25℃，檢測波長為375 nm。標準曲線方程為C=1.49×10-5S-2.40471，r=0.9997，楊梅素在40.0

3、~120.0μg/mL范圍內(nèi)線性相關(guān)良好，方法穩(wěn)定，精密度較高，重復性良好。
　　（2）采用 AFO法，進行了以二氫楊梅素為原料半合成楊梅素的工藝研究；二氫楊梅素在堿性條件下開環(huán)生成查爾酮、Algar-Flynn-Oyamada(AFO)反應(yīng)、HCl溶液調(diào)節(jié)pH等反應(yīng)步驟合成了楊梅素。采用單因素實驗對反應(yīng)參數(shù)進行優(yōu)化，在最佳反應(yīng)條件[二氫楊梅素0.520g，H2O(30 mL)為溶劑，依次加入15% H2O2溶液0.68 mL和1

4、6% NaOH溶液5.5 mL，于35℃反應(yīng)24 h]下，3次驗證試驗楊梅素平均收率為16.21%，RSD=1.78%。
　?。?）采用吡啶熱回流法，研究了以二氫楊梅素為原料半合成楊梅素的工藝研究；二氫楊梅素用吡啶溶液溶解，進行加熱回流反應(yīng)，合成得到楊梅素。采用響應(yīng)面設(shè)計法優(yōu)化了楊梅素合成工藝參數(shù)，其最優(yōu)反應(yīng)參數(shù)為：吡啶體積分數(shù)為66.6%，反應(yīng)溫度為90.36℃，料液比為20.88:1(mg:mL)，反應(yīng)20 h，楊梅素收率預測

5、值為76.48%。驗證實驗實際測得的平均收率為76.63%(n=4)，RSD=1.39%。
　?。?）對合成的楊梅素粗品進行了脫色工藝研究；在單因素試驗的基礎(chǔ)上，以楊梅素脫色率和保留率為指標，選取脫色溫度、活性炭用量、pH和脫色時間，進行4因素3水平正交試驗設(shè)計優(yōu)化脫色工藝。最佳脫色工藝條件為：A3B3C1D1，即在45℃下，加入0.08 g的活性炭，調(diào)節(jié)pH為3.0，脫色10 min。因素影響主次順序為：活性炭用量＞脫色溫度＞p

6、H＞脫色時間。
　　（5）研究了楊梅素的結(jié)晶工藝研究；以甲醇和乙醇作為結(jié)晶溶劑，進行重結(jié)晶純化后，楊梅素純度分別為99.21%和98.89%，產(chǎn)率為48.82%和50.26%。以甲醇和乙醇進行梯度濃度法結(jié)晶，經(jīng)過重結(jié)晶純化后，純度分別達到99.26%和98.89%，產(chǎn)率為69.0%和71.0%。
　?。?）合成楊梅素的結(jié)構(gòu)表征；采用核磁共振氫譜（1H-NMR）、核磁共振碳譜（13C-NMR）、紅外光譜（IR）、紫外光譜（UV