顯齒蛇葡萄制茶廢棄莖中二氫楊梅素制備工藝研究.pdf

1、顯齒蛇葡萄是我國重要的類茶植物，藤茶為其主要加工產(chǎn)品，其加工過程中會產(chǎn)生大量的廢棄莖。武陵山區(qū)每年藤茶產(chǎn)量約為10000噸，產(chǎn)生的廢棄莖約為600噸。DMY是一種食品、藥品添加劑和醫(yī)藥中間體，為顯齒蛇葡萄的重要活性成分。目前高純度的DMY主要從較貴的顯齒蛇葡萄葉中提取，價格昂貴。因此如何利用顯齒蛇葡萄制茶廢棄莖這一丟棄資源提取DMY，提高顯齒蛇葡萄種植和加工的經(jīng)濟效益，具有重要的現(xiàn)實意義。本文對從顯齒蛇葡萄制茶廢棄莖中提取、分離高純度D

2、MY進行了較深入全面的研究，結(jié)果如下：
　?。?）建立了DMY的高效液相色譜檢測方法和總黃酮的雙波長分光光度檢測方法，對顯齒蛇葡萄不同部位DMY和總黃酮含量進行了測定。HPLC測定條件為：色譜柱系Kromasil C18，乙腈:0.05％磷酸（18:82）為流動相，流速為1.0 mL/min，柱溫為27.8℃，檢測波長為292 nm；得標準曲線方程為：C=0.000019S-2.726383， R2=0.9998，C∈(20.3，

3、203μg/mL)。雙波長分光光度法測定條件為：310 nm為測定波長，340 nm為參比波長， AlCl3為顯色劑；得標準曲線方程為：C=18.509ΔA-0.19679，R2=0.9998，C∈(4，24μg/mL)。各部位總黃酮和DMY測定結(jié)果為：總黃酮和DMY含量最高的部位為嫩葉，其含量分別為15.01%、7.79%；DMY占總黃酮比例最高的部位為嫩莖，比例為64.31%；藤茶地上部位總黃酮和DMY含量均大于地下部位。
　

4、?。?）系統(tǒng)研究了酶法提取顯齒蛇葡萄制茶廢棄莖中 DMY的工藝。得提取DMY最優(yōu)工藝參數(shù)為：酶類型為復合酶、溶液pH=4.46、酶解溫度45℃、酶添加量2.0%、料液比為1:20。在此條件下，DMY提取率為30.65%，純度為23.40%。并與傳統(tǒng)提取方法和超聲波輔助提取法進行對比，結(jié)果酶法提取效果最佳。
　?。?）研究了活性炭分離DMY的工藝。在單因素基礎上，采用響應面優(yōu)化出ZX-1號活性炭分離DMY的最佳工藝條件為：pH=2.

5、09，溫度50.51℃，活性炭用量為19.80%。在此條件下，DMY的收率為96.99%，純度由23.40%提高到33.29%。
　?。?）確定了DMY的溶劑萃取工藝條件。其優(yōu)化條件為：萃取試劑為乙酸乙酯，萃取時間8.52 min，萃取溫度59.26℃，料液比0.013 g/mL。在此條件下，DMY的收率為86.01%，純度由33.29%提高到66.01%。
　?。?）系統(tǒng)研究了DMY的結(jié)晶工藝。采用乙醇濃度梯度對DMY進行

6、結(jié)晶，通過正交實驗得出最佳工藝條件為：養(yǎng)晶時間96 h，養(yǎng)晶溫度為7℃，結(jié)晶試劑乙醇濃度為16.67%。在此條件下，進行3次結(jié)晶后，DMY收率為79%，純度可以達到98%以上。
　　（6）采用UV、HPLC、IR、1H-NMR、13C-NMR對98%DMY進行結(jié)構(gòu)表征。結(jié)果顯示：從顯齒蛇葡萄制茶廢棄莖中提取的 DMY樣品和對照品的吸收光譜一致，HPLC的出峰時間相同，IR的光譜圖一致，1H-NMR、13C-NMR化學位移相同；說明