蛇葡萄素脂質(zhì)體劑型的研究.pdf

1、本文研究的目的：從蛇葡萄素脂質(zhì)體凍干粉的工藝研究入手，探討蛇葡萄素的理想劑型。其意義是為蛇葡萄素的早日開發(fā)提供藥劑學實驗資料。 研究方法： 1.用均勻設計法優(yōu)化選擇蛇葡萄素和各種處方之間的關系，尋找合適比例，用旋轉薄膜—超聲法制備制作蛇葡萄素脂質(zhì)體，觀察外觀。 2.利用電子顯微鏡用負染色法觀察脂質(zhì)體表面形態(tài)。用Zetasizer3000(粒度測定儀)測定粒徑。用紫外分光光度法測定標準曲線，回收率，樣品含量，精密度

2、和磷脂氧化率。用透析袋和磁力攪拌器結合紫外分光光度法測定蛇葡萄素脂質(zhì)體的包封率，滲漏率。 3.利用冷凍干燥技術把蛇葡萄素脂質(zhì)體制成凍干粉，從而制成前體脂質(zhì)體。 4.用MTT法測定蛇葡萄素脂質(zhì)體對人肝癌細胞HepG2增殖的影響，計算抑制率和IC50，同時，觀察是否存在時間和劑量依賴性。 5.用MTT法測定蛇葡萄素脂質(zhì)體對人白血病細胞K562增殖的影響，計算抑制率和IC50，同時，觀察是否存在時間和劑量依賴性。

3、 研究結果： 1.成功制得蛇葡萄素脂質(zhì)體，成品呈乳白色透明狀混懸液，顏色均勻。 2.(1)利用電子顯微鏡用負染色法觀察脂質(zhì)體表面形態(tài)中的脂質(zhì)體微球呈典型單室，規(guī)則橢圓型，大小相近，分散均勻。用Zetasizer3000(粒度測定儀)測定粒徑：258.2±51.2nm，表面電荷19.0mV；(2)回收率(n=3)：(102.14±0.42)％；(3)藥物總濃度(n=3)：C=16.69±0.06mg/ml；(4)藥物的包

4、封率(n=3)為：(62.3±0.1)％，藥物的滲漏率(n=3)為：第五天：(2.4±0.8)％；第十五天：(6.1±1.7)％；第三十天：(13.9±1.3)％；第五十天：(19.4±2.2)％；(5)磷脂氧化率(n=3)：(0.83±0.01)％。 3.(1)蛇葡萄素脂質(zhì)體制得的凍干粉均呈疏松，均勻，飽滿狀，加水經(jīng)輕搖即可良好分散。凍干粉西林瓶密封后，可長時間保存外觀不變。(2)蛇葡萄素脂質(zhì)體凍干粉水溶解后的外觀和包封率隨時

5、間的延長變化不大，包封率第一天：(60±1.2)％；第三十天：(60±0.5)％；第五十天：(59.3±1.3)％。 4.不同濃度的蛇葡萄素脂質(zhì)體對人肝癌細胞HepG2有不同的增殖抑制作用，且呈明顯的劑量和時間依賴性關系，蛇葡萄素脂質(zhì)體含藥量在體外濃度為27、54、108、216、432、864、1728μmol/L，處理時間為24h、48h、72h時，脂質(zhì)體劑型的IC5o分別是687.8μmol/L、204.0μmol/L和8

6、4.0μmol/L，非脂質(zhì)體的IC50分別是455.5μmol/L、250.4μmol/L和222.8μmol/L。 5.不同濃度的蛇葡萄素脂質(zhì)體劑型對人白血病細胞K562有不同的增殖抑制作用，且呈明顯的劑量和時間依賴性關系，蛇葡萄素脂質(zhì)體含藥量在體外濃度為3.4、6.8、13.6、27.2、54.4、108.8、217.6μmol/L，處理時間分別為24h、48h、72h時，脂質(zhì)體劑型的IC50分別是46.3μmol/L、34

7、.3μmol/L和12.6μmol/L，非脂質(zhì)體的IC50分別是37.1μmol/L、25.0μmol/L和23.4μmol/L。 研究結論：實驗結果表明成功制備了蛇葡萄素脂質(zhì)體劑型，并確定蛇葡萄素脂質(zhì)體的分離、質(zhì)量評價及穩(wěn)定性研究。蛇葡萄素脂質(zhì)體制成凍干粉后，有利于保存并且對蛇葡萄素脂質(zhì)體的包封率影響不大。蛇葡萄素脂質(zhì)體劑型和同等含藥濃度的蛇葡萄素非脂質(zhì)體都具有抑制人肝癌細胞HepG2和人白血病細胞K562增殖的作用，但是在藥