IL-6基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)性與靜脈血栓栓塞癥相關(guān)性研究.pdf

1、目的：了解血清白介素6（IL-6）濃度及其啟動(dòng)子區(qū)-597G/A和-572C/G基因多態(tài)性與靜脈血栓栓塞癥相關(guān)性，分析炎性因子與纖維蛋白原（Fib)、D-二聚體(D-D)之間的相關(guān)性，探討炎癥反應(yīng)和凝血指標(biāo)之間的相互作用及其在VTE中的作用和機(jī)制。
　　 方法：⑴標(biāo)本采集患者來源于新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院骨科、血管甲狀腺外科、呼吸科和心血管內(nèi)科2009年3月—2010年3月住院患者，病例組246例，男性128例，女性118例，年

2、齡（57.02±15.97歲），對照組均來自我院體檢中心健康體檢者，共292例，男性154例，女性158例，年齡（54.39±14.42歲）。⑵利用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）測定VTE組和對照組炎性因子IL-6、TNF-α和C反應(yīng)蛋白的水平，比較兩組間炎性因子水平有無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑶基因組DNA提取 以酚-氯仿-異戊醇抽提法提取單個(gè)核細(xì)胞基因組DNA。⑷PCR擴(kuò)增及產(chǎn)物分析 采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性酶切片段長度多態(tài)性（PCR-RFLP

3、）核苷酸分型技術(shù)檢測IL- 6基因-597G/A和-572C/G基因多態(tài)性，根據(jù)凝膠電泳所見條帶區(qū)分研究對象的基因型，并統(tǒng)計(jì)各基因型頻率和等位基因頻率，并分析基因多態(tài)性與VTE的相關(guān)性。⑸統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。用基因計(jì)數(shù)方法計(jì)數(shù)各組等位基因頻率和基因型頻率。計(jì)量資料用 ±s, 兩組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)和秩和檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用檢驗(yàn)。相關(guān)性采用Spearman秩相關(guān)分析。
　　 結(jié)果：①年齡>50歲、感染

4、、手術(shù)或創(chuàng)傷、腫瘤是VTE的最常見危險(xiǎn)因素，隨著年齡的增加，VTE的發(fā)病率明顯增加，男女之間的發(fā)病率無明顯差別。VTE的臨床癥狀中最常見的是呼吸困難、心悸、胸痛、發(fā)熱，體征中呼吸頻率加快、頸動(dòng)脈充盈、下肢水腫最常見。②病例組TNF-α、IL-6、血小板、白細(xì)胞、心率、體重指數(shù)、肌酐、纖維蛋白原、D-二聚體等指標(biāo)較對照組明顯變化，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。③VTE組IL-6、TNF-α和C反應(yīng)蛋白水平較對照組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

5、意義。（P<0.05)。本實(shí)驗(yàn)采用ELISA方法測定VTE組人血清IL-6、CRP、TNF-α水平較對照組明顯升高，炎性因子與凝血指標(biāo)密切相關(guān)，炎性因子水平與PTE栓塞面積大小呈正相關(guān)，炎性反應(yīng)與血?dú)夥治鼋Y(jié)果密切相關(guān)，有炎癥反應(yīng)VTE組的血栓發(fā)生率較無炎癥反應(yīng)組明顯偏高。④IL-6基因-597G/A位點(diǎn)有GG、GA兩種基因型，-597 G/A基因型頻率為GG[46(8.55%)]、GA[492(91.45%)]，病例組-597 G/A多

6、態(tài)性與對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05)；IL-6基因-572G/C位點(diǎn)有CC、CG、GG三種基因型，-572 G/C基因型頻率為CC[148(27.5%)]、GG[62(11.5%)],CG[174(64.7%)]。病例組IL-6基因-572C/G多態(tài)性與對照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05)，病例組中不同性別和民族的等位基因頻率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05)。IL-6基因-572 C/G不同基因型間中性粒細(xì)胞差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

7、P<0.05)，相關(guān)分析顯示兩者有相關(guān)性（r=0.63，P<0.05)。IL-6基因-572 C/G基因型與TC、HDL-C密切相關(guān)，高血壓可能是不同基因型組間VTE的可能保護(hù)因素，IL-6基因-572 C/G不同基因型組間血壓和心率有顯著差異（P<0.05）。IL-6基因-572 C/G的CC型和CG+GG型相比，左心功能不全患病率較高，預(yù)后較差（P<0.05）。IL-6基因-572C/G基因多態(tài)性與VTE心電圖表現(xiàn)可能有相關(guān)性。