手性元素修飾的聚酰胺介導(dǎo)原癌基因c-kit高表達的腫瘤細胞凋亡.pdf

1、腫瘤是嚴重威脅人類健康的重大疾病之一，雖然傳統(tǒng)的手術(shù)療法、放療和化療取得了一定的進展，但腫瘤患者的五年生存率仍然普遍偏低。靶標治療現(xiàn)已成為當今腫瘤研究的主要方向，而多靶點藥物在治療的同時也伴隨著強烈的副作用。尋找單靶點低毒高效的抗腫瘤藥物是非常必要的。原癌基因c-kit與腫瘤的關(guān)系非常密切，且高表達于某些腫瘤細胞中。聚酰胺分子在DNA小溝能特異性地對DNA堿基具有1∶1的識別作用，被認為是目前對DNA堿基特異性識別能力最強、極有希望研發(fā)

2、成基因靶向藥物的合成小分子。
　　基于實驗室原有的研究基礎(chǔ)，本論文設(shè)計了五種以c-kit基因為靶點的聚酰胺小分子;試圖探求這五種新的化合物對原癌基因c-kit高表達的幾種癌細胞的抑制作用。利用RT-PCR(Transcription PolymeraseChain Reaction)技術(shù)，篩選出了四種高表達c-kit基因的腫瘤細胞并作為后續(xù)實驗的靶細胞。采用Native-PAGE(Native-Polyacylamide GelE

3、lectrophoresis)方法，考察了聚酰胺小分子與c-kit基因在體外基因水平上的相互作用;結(jié)果顯示，聚酰胺4和聚酰胺5與c-kit基因有明顯的結(jié)合，且聚酰胺5與c-kit基因的相互作用要強于聚酰胺4。RTCA(Real Time Cell Analysis)技術(shù)可實時監(jiān)測細胞的生長狀況，在體外細胞水平上，80μM聚酰胺4和20μM聚酰胺5可強烈的抑制BEL7402（肝癌）和MKN45（低分化胃癌）細胞的生長。此外，通過體外細胞實

4、驗還考察了實驗室研究的另一類具有潛在抗腫瘤活性的萘酰亞胺分子的細胞毒性作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在A549（肺腺癌）和SGC7901（胃低分化腺癌）細胞中，1μM的聚酰胺5和20μM的三種萘酰亞胺分別單獨作用時對腫瘤細胞的抑制性非常弱;而當1μM聚酰胺5和20μM萘酰亞胺或者0.1μg/mL抗c-kit單克隆抗體聯(lián)用時，細胞毒性作用明顯增強。其中，1μM聚酰胺5聯(lián)合20μM萘酰亞胺2對A549細胞的細胞毒性最強，而1μM聚酰胺5聯(lián)合抗c-kit單