胃腸道間質(zhì)腫瘤c-kit和PDGFR-α基因的突變和表達(dá)及其臨床意義的研究.pdf

1、胃腸道間質(zhì)腫瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)是位于胃腸道或腹腔內(nèi)表達(dá)CD117的間葉源性腫瘤,是胃腸道最常見的間葉源性腫瘤,其發(fā)病率有逐年增高的趨勢(shì).大多數(shù)GISTs存在c-kit.基因功能獲得性突變,而c-kit基因突變?cè)贕IST發(fā)病過程中發(fā)揮關(guān)鍵的作用.最近發(fā)現(xiàn)一部分GISTs(5-7﹪)無c-kit基因突變,也未見CD117表達(dá),但這部分GIST具有PDGFR-α基因的激活性突變,并且可

2、見PDGFR-α,DOG1和PKC0等的表達(dá),因而PDGFR-α,DOGl和PKC0有可能作為一種診斷GIST的新的標(biāo)記物,特別是一些CD117陰性表達(dá)的GIST.目前國內(nèi)在此方面的研究還很少,PDGFR-α在胃腸道間質(zhì)腫瘤中的表達(dá)尚未見報(bào)道,為此我們檢測(cè)了119例GIST中PDGFlR-α,PDGFR-β和CD117的表達(dá)情況以及50例GISTs c-kit基因第9,11,13,17號(hào)外顯子以及PDGFR-α基因12和18號(hào)外顯子突變

3、情況,探討c-kit和PDGFR-α基因突變及其蛋白表達(dá)在胃腸道間質(zhì)腫瘤發(fā)病中的作用及其與臨床病理、預(yù)后的關(guān)系.DOG1是一種在GIST中呈高表達(dá)的蛋白質(zhì),但是,目前對(duì)DOG1蛋白的功能還未知.我們檢測(cè)了25例GISTs中DOGl mRNA表達(dá)水平,探討DOGJ基因轉(zhuǎn)錄水平改變?cè)贕lST發(fā)病中的作用以及臨床意義. 第一部分:胃腸道間質(zhì)腫瘤中c-kit和PDGFR-α基因的突變檢測(cè) 采用DHPLC技術(shù)和直接測(cè)序的方法對(duì)50

4、例GISTs中c-kit基因第9,1 1,13,17號(hào)外顯子以及.PDGFR-α基因12,18號(hào)外顯子突變情況進(jìn)行檢測(cè),研究胃腸道間質(zhì)腫瘤中c-kit和PDGFR-α基因的突變情況,c-kit脅基因突變和.PDGFR-α基因突變的關(guān)系,c-kit和PDGFR-α因突變與胃腸道間質(zhì)腫瘤臨床病理因素的關(guān)系,探討c-kit和PDGFR-α基因突變?cè)谖改c道間質(zhì)腫瘤發(fā)病中的作用及其與臨床病理、預(yù)后的關(guān)系. 第二部分:CD-117、PDGF

5、R-α、β在胃腸道間質(zhì)腫瘤中的表達(dá)及其臨床意義 應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)119例胃腸道間質(zhì)腫瘤中CD117、PDGFR-α、PDGFR-β的表達(dá)情況,分析各指標(biāo)相互之間的關(guān)系以及在GIST不同生物學(xué)侵襲行為組間的差異,同時(shí)也分析了c-kit、PDGFR-α基因突變和ICD117、PDGFR-α蛋白表達(dá)的關(guān)系. 第三部分:胃腸道間質(zhì)腫瘤中DOG1 mRNA表達(dá)水平的檢測(cè) 運(yùn)用半定量RT-PCR方法檢測(cè)了25例GI

6、STs中DOG1 mRNA表達(dá)水平,并分析了DOG1 mRNA表達(dá)與c-kit、PDGFR-α基因突變以及蛋白表達(dá)的關(guān)系,探討DOG1基因轉(zhuǎn)錄水平改變?cè)贕IST發(fā)病中的作用以及臨床意義. 結(jié)論： 1.本組胃腸道間質(zhì)腫瘤中,c-kit基因的突變率為42﹪,均為外顯子11的突變,未發(fā)現(xiàn)外顯子9,13,17的突變.突變"熱點(diǎn)"位于11號(hào)外顯子近膜區(qū)的5'端第556-560密碼子之間. 2.本組胃腸道間質(zhì)腫瘤中,PDGF

7、R-α基因的突變率為20﹪,大部分為第18號(hào)外顯子的突變,少數(shù)為第12號(hào)外顯子的突變.最常見的突變類型為第18號(hào)外顯子D842V點(diǎn)突變. 3.突變位點(diǎn)與起源部位和組織學(xué)形態(tài)有關(guān),并且PDGFR-α基因的突變生物學(xué)行為具有高度侵襲危險(xiǎn)性,對(duì)預(yù)后有提示作用. 4.本組病例中GIST沒有發(fā)生c-kit和PDGFR-α基因同時(shí)突變.推測(cè)作為胃腸道間質(zhì)腫瘤發(fā)病的兩種重要的分子機(jī)制,c-kit和PDGFR-α基因突變是相互排斥的,不