他汀聯(lián)合內(nèi)皮祖細(xì)胞移植治療周圍血管病的基礎(chǔ)研究.pdf

1、目的：觀察辛伐他汀對人外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelialprogenitor cell，EPC)的影響。 方法：采用密度梯度離心法從人外周血獲取單個(gè)核細(xì)胞，將其接種在人纖維連接蛋白包被培養(yǎng)板，培養(yǎng)7天后，收集貼壁細(xì)胞，加入不同濃度辛伐他汀(分別為0.0001、0.001、0.01、0.1、1.0μmol/L)培養(yǎng)24小時(shí)。激光共聚焦顯微鏡鑒定FITC-UEA-I和DiI-acLDL雙染色陽性細(xì)胞為正在分化的EPC，并在倒置熒

2、光顯微鏡下計(jì)數(shù)。分別采用 MIT比色法測定EPC的增殖能力、改良的Boyden小室測定EPC的遷移能力、黏附實(shí)驗(yàn)測定EPC的黏附能力、SA-β-Gal和DAPI雙染測定衰老的EPC、流式細(xì)胞儀檢測凋亡細(xì)胞。 結(jié)果：辛伐他汀顯著增加外周血EPC數(shù)量(P<0.01)，明顯改善外周血EPC的增殖能力、遷移能力和黏附能力(P<0.01或P<0.05)，0.01μmol/L辛伐他汀為最大增加EPC數(shù)量、促增殖、促遷移、促黏附效應(yīng)。當(dāng)加入PI