Martentoxin調制平滑肌型BK-,Ca-通道（α+β1）的藥理機制研究.pdf

1、α+β1型BK通道作為血管平滑肌細胞膜上表達豐度最高的鈣激活鉀通道，相比其它BK通道亞型具有更高的鈣離子敏感性，在平滑肌收縮時可被胞內升高的鈣離子激活，引起K+外流，細胞超極化，阻止肌細胞的收縮，并促進肌細胞的舒張，其功能的失調可誘導慢性肺動脈高壓、腦血管痙攣引起的偏頭痛和血管平滑肌的習慣性收縮等病理反應。因此，發(fā)掘和鑒定α+β1型BK通道的高特異性配體和調制劑，不僅可促進平滑肌型BK通道生理/病理功能調控特征的研究，還對該通道相關臨床

2、疾病藥物的研發(fā)具有重要的理論指導參考價值與實際運用意義。Martentoxin是自東亞鉗蝎(Buthus martensi Karsch，BmK)蝎毒中純化的一個37肽短鏈毒素，積累的研究資料表明，該毒素可以鈣依賴方式調控神經型BK通道(α+β4)的活性。 本論文利用細胞轉染、膜片鉗和熒光成像等方法，研究了martentoxin對平滑肌型BK通道(α+β1)的藥理調制效應及其機制。研究發(fā)現(xiàn)，當細胞內液中自由鈣濃度分別被控制在70

3、0 nM和25μ M時，martentoxin可濃度依賴地增強α+β1型BK通道的活性。當細胞內液中缺失鈣離子時，martentoxin喪失對α+β1型BK通道的調制能力；分別700 nM和25μM兩種鈣濃度存在下，martentoxin對α+β1型BK通道電流的增強比率無顯著性差異，但在高鈣時，martentoxin增大α+β1型BK通道電流至峰值所需的最短時間更少，提示了martentoxin對α+β1型BK通道的藥理效應僅依賴于內

4、鈣的有無，受內鈣濃度的高低影響較小，內鈣濃度的升高僅能促進martentoxin和α+β1型BK通道的快速作用。此外，在相同條件下，martentoxin對僅由α亞基構成的BK通道無顯著的藥理調制效應，提示martentoxin可能通過與β1亞基直接作用增強α+β1型BK通道的活動。另外，恒定胞內鈣濃度，經不同電壓刺激，martentoxin對α+β1型BK通道的藥理效應無顯著變化。進一步的藥理競爭實驗表明：被martentoxin增強