TGF-β1誘導(dǎo)外周血和臍血中CD4+CD25-T細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)镃D4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的比較.pdf

1、目的：用轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）誘導(dǎo)人外周血及臍血中CD4+CD25-T細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)镃D4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，并對(duì)之進(jìn)行表型及功能的分析、比較，探討分離培養(yǎng)臍血來源的CD4+CD25+調(diào)節(jié)性 T細(xì)胞的可能性。
　　方法：采集產(chǎn)科足月順產(chǎn)兒的臍靜脈血10例，再采集本校新生體檢健康者外周靜脈血10例，男女各5例。用免疫磁珠法（MACS）分選出CD4+CD25-T細(xì)胞，并用TGF-β1進(jìn)行誘導(dǎo)，分別應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)（FCM）、

2、逆轉(zhuǎn)錄 PCR（RT-PCR）和抑制試驗(yàn)測(cè)定誘導(dǎo)后細(xì)胞的CD25、Foxp3表達(dá)和免疫抑制功能，比較兩組之間CD4+CD25+ T細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、抑制功能的差異。
　　結(jié)果：
　　1）用MACS的方法從臍血和外周血分選到純度大于90％的CD4+CD25+T細(xì)胞。
　　2）臍血和外周血分選得到的CD4+CD25-T細(xì)胞在TGF-β1作用下CD25分子表達(dá)不同，經(jīng)FCM分析，分別為：（77.9±2.3）%和（65.7±4.2）

3、%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3）RT-PCR檢測(cè)，臍血和外周血來源的CD4+CD25-T細(xì)胞經(jīng) TGF-β1誘導(dǎo)產(chǎn)生的CD4+CD25+ T細(xì)胞和新鮮分離出的CD4+CD25+ T細(xì)胞均表達(dá)Foxp3，且TGF-β1誘導(dǎo)產(chǎn)生的CD4+CD25+T細(xì)胞的Foxp3的表達(dá)量可能更高
　　4）3H-TdR摻入試驗(yàn)中在加入臍血和外周血來源的經(jīng)TGF-β1誘導(dǎo)產(chǎn)生的細(xì)胞后cpm值分別為：11739±352和18732±437，陰性對(duì)照