FTY720對大鼠脊髓損傷后脊髓內T淋巴細胞亞群的影響.pdf

1、目的:
　　 建立大鼠脊髓損傷模型，觀察急性脊髓損傷后脊髓內的CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞及FTY720對它們的影響。
　　 方法:
　　 雌性健康SD大鼠75只隨機分為3組:假手術組（A組）、對照組（B組）和FTY72O治療組（C組），其中A組、B組和C組各25只。A組只做T9、T10椎板切除不打擊脊髓，0.3mL生理鹽水灌胃;B組打擊脊髓后以0.3ml生理鹽水灌胃;C組:打擊脊髓后3mg/kgFTY

2、720稀釋后0.3mL灌胃，3天后再次灌胃用藥。在術后3d、4w、2w、3w、4w處死大鼠取材，各時間點各組取15只，行HE染色及免疫熒光染色，觀察各組脊髓壞死、炎細胞浸潤、脊髓空洞等情況。免疫熒光染色觀察脊髓內聚集的CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞并進行細胞計數(shù)，數(shù)據(jù)采用SPSS13.0進行統(tǒng)計學處理。
　　 結果:
　　 1.HE染色組織形態(tài)學顯示假手術組（A組）各時間點SD大鼠脊髓結構完整，神經元形態(tài)正常，灰

3、質白質交界清楚，未見出血、水腫、空洞、炎癥細胞浸潤等改變。3天、7天、14天、21天時間點上我們可以看到FTY720治療組（C組）雖然在脊髓損傷后在微環(huán)境的變化周期與對照組（B組）基本相同，但細胞浸潤程度，特別是淋巴細胞浸潤程度，以及膠質癱痕和空洞的大小均明顯輕于模型組（B組），而28天時治療組（C組）的細胞浸潤程度要高于模型組（B組）。
　　 2.免疫熒光結果:1）假手術組（A組）脊髓內未見陽性表達。2）在FTY720治療組和

4、對照組中，CD4+T淋巴細胞在3～7天時達到第一個高峰，7～14天有一下降趨勢，21～28天出現(xiàn)第二次的上升。14天時C組相對于B組CD4+T淋巴細胞數(shù)目明顯減少，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，而21天時C組相對于B組CD4+T淋巴細胞數(shù)目明顯升高，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義。3）CD8+T淋巴細胞3天時數(shù)目很少;7天時B組明顯增多，C組較B組少;14天和21天時B組維持在較低水平，無明顯變化，而C組我們可以看到14天時有一明顯的增多，2

5、1天時又下降到較低水平;28天時B組和C組都有一較明顯的增多趨勢。但是B組各相鄰時間點之間無顯著差異。C組14天時相對于B組CD8+T淋巴細胞數(shù)目明顯增多，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義。
　　 結論:
　　 1.正常健康SD大鼠的脊髓內無活化的T淋巴細胞。脊髓損傷后的SD大鼠脊髓損傷區(qū)域出現(xiàn)大量的T淋巴細胞，其中以CD4+T淋巴細胞為主。CD4+T淋巴細胞是脊髓損傷后的主要效應T淋巴細胞。FTY720可以抑制免疫細胞在脊髓

6、損傷后的SD大鼠脊髓內的聚集。
　　 2.脊髓損傷后的SD大鼠脊髓內出現(xiàn)大量的CD4+T淋巴細胞，在3～7天時達到第一個高峰，7～14天有一下降趨勢，21～28天出現(xiàn)第二次的上升。FTY720在大鼠脊髓損傷14天時抑制脊髓內CD4+T淋巴細胞的聚集。
　　 3.脊髓損傷后的SD大鼠脊髓內出現(xiàn)少量的CD8+T淋巴細胞。CD8+T淋巴細胞不是脊髓損傷后主要的效應細胞。FTY720對CD8+T淋巴細胞早期無明顯影響。