脊髓腫瘤壞死因子-alpha(TNF-α)對(duì)大鼠切割損傷導(dǎo)致的機(jī)械痛敏的影響.pdf

1、目的：觀察大鼠后足切割后脊髓腫瘤壞死因子-alpha(TNF-α)mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)情況，并觀察鞘內(nèi)注射TNF-α溶解性受體依那西普(Etanercept)對(duì)大鼠后足切割損傷誘發(fā)的機(jī)械痛敏的作用，探討TNF-α在外科手術(shù)疼痛的作用，并為此藥在以后的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　 方法：⑴健康成年雄性SD大鼠48只，隨機(jī)分六組（對(duì)照組、1h、3h、6h、24h、72h，n＝8）。采用縱行切割大鼠右后足作為外科疼痛模型，以vonFr

2、ey尼龍纖維刺激足底觀察其50％縮足閾值作為機(jī)械痛敏的評(píng)價(jià)方法。⑵在切割機(jī)械性痛敏產(chǎn)生的不同時(shí)段（對(duì)照組、1h、3h、6h、24h、72h），取大鼠腰段脊髓，腰段為與坐骨神經(jīng)相連節(jié)段。用實(shí)時(shí)定量RT-PCR方法和免疫組化方法檢測TNF-αmRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)的變化。⑶健康成年雄性SD大鼠32只，隨機(jī)分為四組(n＝8)。NS(IT)組，鞘內(nèi)注射生理鹽水，后足不行切割手術(shù)；E(IT)組，鞘內(nèi)注射依那西普，后足不行切割手術(shù)；NS(IT)＋I(xiàn)n

3、ci組，鞘內(nèi)注射NS，后足行切割手術(shù)；E(IT)＋I(xiàn)nci組，鞘內(nèi)注射依那西普，后足行切割手術(shù)。在各時(shí)間點(diǎn)（術(shù)前基礎(chǔ)值，1h，3h，6h，24h，72h）測大鼠右后足50％縮足閾值。
　　 結(jié)果：①大鼠右后足切割后痛閾均明顯下降（P＜0.05，與基礎(chǔ)水平相比），其中切割后3h痛閾降低最為顯著，以后痛閾逐漸回升，72h后痛閾恢復(fù)至基礎(chǔ)值。②后足切割后，脊髓水平TNF-αmRNA水平明顯上調(diào)，與假手術(shù)組相比，切割后3h和6hTNF-

4、αmRNA水平明顯升高(P＜0.05)。TNF-α表達(dá)的峰值在切割后6h。術(shù)后72h，TNF-α的表達(dá)與假手術(shù)組接近。③免疫組化結(jié)果顯示，后足切割后3h和6h，脊髓后角TNF-α水平明顯上調(diào)。通過免疫雙標(biāo)觀察，上調(diào)TNF-α主要表達(dá)在神經(jīng)元上，星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞有少量表達(dá)。④鞘內(nèi)注射依那西普對(duì)基礎(chǔ)痛閾并沒有改變（P＞0.05，與生理鹽水相比），但可減輕切割損傷導(dǎo)致的機(jī)械痛敏。
　　 結(jié)論：⑴大鼠切割損傷后導(dǎo)致痛覺行為學(xué)變化